The proposed method determines the activity of cholesterol esterase (CEH) and takes advantage of its ability to catalyze the hydrolysis of cholesterol esters naturally present in human serum. The assay is based on Allain's method of spectrophotometric determination of cholesterol by means of cholesterol oxidase, peroxidase, but using 3,5-dichloro-dihydroxybenzenesulfonic acid (DHBS) as phenolic chromogen and human serum as a source of substrate for the CEH as a novelty. Furthermore, it is characterized by low costs and high precision. It can be employed to control the activity of CE preparations used for the preparation of enzymatic kits for the determination of cholesterol or for screening of potential bacterial enzyme producers.
Celem niniejszej pracy była ocena przydatności metody enzymatycznej i zestawu analitycznego „Alkotest” do analizy ilościowej zawartości etanolu w winach, napojach owocowych i sokach, miodzie pitnym i piwie bezalkoholowym. Na podstawie uzyskanych wyników stwierdzono przydatność metody enzymatycznej do oznaczania zawartości etanolu w badanych produktach. Zastosowana metoda jest znacząco tańsza w porównaniu z innymi metodami enzymatycznymi dzięki niskim kosztom preparatu oksydazy alkoholowej (AO), otrzymanego ze zmutowanego szczepu drożdży metylotroficznych Hansenula polymorpha C-105 (gcr1 catX) z zaburzoną represją kataboliczną syntezy AO. Wykazano, że różny skład chemiczny win owocowych i soków nieznacznie wpłynął na oznaczanie zawartości alkoholu. Porównanie metody „Alkotest” i jej modyfikacji „Multiple Addition Test” umożliwiło wnioskowanie o braku istotnego negatywnego wpływu komponentów występujących w winach owocowych na wyniki oznaczania stężenia etanolu. Zastosowanie metod „Multiple Addition Test” i chromatografii gazowej (GC) potwierdziło ten wniosek. Wyniki uzyskane z porównania obu metod były zgodne, a współczynniki korelacji wynosiły odpowiednio r = 0,997 (p < 0,0001) w przypadku win owocowych czerwonych oraz r = 0,998 (p < 0,0001) – win owocowych białych.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.