Preferencje help
Widoczny [Schowaj] Abstrakt
Liczba wyników

Znaleziono wyników: 25

Liczba wyników na stronie
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników

Wyniki wyszukiwania

Wyszukiwano:
w słowach kluczowych:  mikroiniekcja
help Sortuj według:

help Ogranicz wyniki do:
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
Iniekcja plemnika do cytoplazmy oocytu (ICSI) jest jedną z metod wspomaganego rozrodu, która znalazła zastosowanie w pozaustrojowej produkcji zarodków u zwierząt oraz leczeniu niepłodności u ludzi. Metoda ICSI umożliwia eliminację zjawiska polispermii, wykorzystanie plemników jako wektorów egzogennego DNA w celu uzyskania zwierząt transgenicznych, wspomaga tworzenie programów zachowania bioróżnorodności oraz poznanie mechanizmów zachodzących w trakcie zapłodnienia i wczesnego rozwoju zarodkowego. Zapłodnieniu metodą ICSI poddaje się oocyty dojrzałe in vitro, in vivo i kriokonserwowane oraz nasienie ejakulowane bądź najądrzowe, świeże lub konserwowane. Iniekcję plemnika przeprowadza się w mikroskopie odwróconym z dołączonym mikromanipulatorem wyposażonym w pipetę podtrzymującą oraz iniekcyjną. Po wykonaniu iniekcji oocyty poddaje się sztucznej aktywacji i przeznacza do hodowli in vitro. Uzyskane zarodki poddaje się ocenie jakości. Pomimo potencjalnych możliwości związanych z ICSI wciąż istnieją problemy, które ograniczają wdrożenie tej metody zapłodnienia do pozaustrojowej produkcji zarodków na skalę komercyjną. Czynnikami mogącymi wpływać na efektywność ICSI są: jakość oocytów i plemników oraz ich przygotowanie do zapłodnienia, uszkodzenia oocytu powstałe w trakcie iniekcji, toksyczność związków wykorzystywanych do spowolnienia ruchu plemników i aktywacja oocytów po iniekcji. W wyniku zapłodnienia metodą ICSI liczba uzyskanych zarodków jest niska, a ich jakość często jest obniżona. Niezbędne są zatem dalsze badania optymalizujące nie tylko samą technikę zapłodnienia, ale również poszczególne jej etapy, tj. dojrzewanie in vitro oocytów oraz przygotowanie plemników.
Problems associated with in vitro fertilization of horses were the subject of the present review. The paper presents the intracytoplasmic sperm injection (ICSI) technique. Oocytes for in vitro fertilization can be obtained either from living or slaughtered mares and then cultured. Afterwards they are washed and only those containing 1 polar body are used for microinjection. All kinds of spermatozoa (heads, immobile spermatozoa, dead and abnormal) can be used. Several foals have been born in the USA, Europe and Australia after in vitro fertilization. The technique can be successfully applied in breeding programs which accept stallions with low volume or motility spermatozoa.
In the past few years increased progress in the in vitro maturation (IVM) and fertilization (IVF) of porcine oocytes has occurred. The recovery of oocytes with full developmental competition was possible in the case of improved in vitro culture (IVC) methods. However, there is still a large problem with polispermic embryos produced by IVF. The construction of culture media supplemented with hormones, amino acids and enzymes belongs to the most important factor in the decreasing of the polyspermy rate. These combinations lead to the decreased polyspermy rate and increased efficiency of fertilizations. The microsurgical injection of single spermatozoon into oocytes (ICSI) belongs to one of the most frequently used techniques. This method omits the natural selection of spermatozoa but may lead to the induction of several developmental defects in offspring. In this review the experimental results associated with in vitro techniques used in porcine reproductive biology have been presented.
The aim of this study was to obtain embryos after assisted fertilization of oocytes collected from slaughtered mares and matured in vitro by an intracytoplasmic sperm injection (ICSI) and to establish optimal conditions for the in vitro culture of the embryos. Oocytes were collected by the scraping method and cultured in vitro in TCM with Earl’s salts supplemented with 20% FBS, 5 g/ml FSH, estradiol 1 g/ml, pyruvate and glutamine. After a 30-hour in vitro culture oocytes that had reached the metaphase II stage were subjected to an intracytoplasmic sperm microinjection (ICSI) with frozen semen. After thawing, a motile sperm selection was carried out by the „swim up” method. Then the sperm was immobilized, aspirated into an injection pipette, and introduced into the cytoplasm of an oocyte. Microinjected oocytes were transferred onto a culture medium: DMEM F12 or SOF. The control group consisted of oocytes subjected to microinjection without sperm (sham ICSI). Oocytes that did not show signs of development and embryos in different developmental stages were fixed and stained with Hoechst fluorochrome. The in vitro culture of embryos in the DMEM F12 medium produced only early stages of development (pronucleus, two-blastomere embryos). In contrast, the in vitro culture in the SOF medium produced embryos in the morula stage (6.8%). In the control group, no signs of embryonic development were observed.
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.