Preferencje help
Widoczny [Schowaj] Abstrakt
Liczba wyników

Znaleziono wyników: 14

Liczba wyników na stronie
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 1 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników

Wyniki wyszukiwania

help Sortuj według:

help Ogranicz wyniki do:
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 1 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
2
51%
W degradacji parakazeiny do niskocząsteczkowych związków azotowych oraz w generowaniu smaku i zapachu sera Gouda bardziej istotne od peptydaz, uwalnianych po autolizie kultur zakwasu, okazały się niepochodzące z zakwasu pałeczki mlekowe. Zastosowanie w technologii serowarskiej wyselekcjonowanych szczepów pałeczek mlekowych ogranicza wzrost pałeczek niepochodzących z zakwasu, a jednocześnie umożliwia intensyfikację i modyfikację cech sensorycznych sera. Warunkiem niezbędnym stosowania pałeczek Lactobacillus w technologii serów dojrzewających jest poznanie ich aktywności peptydazowej. Celem podjętych badań była ocena aktywności amino- oraz dipeptydaz wybranych szczepów Lactobacillus (L. acidophilus, L. casei, L. casei ssp. rhamnosus). Będące przedmiotem badań szczepy Lactobacillus syntetyzowały peptydazy hydrolizujące preferencyjnie podobne substraty. Dominującą grupą peptydaz, w przypadku wszystkich szczepów, były aminopeptydazy. Aminopeptydazy syntetyzowane przez poszczególne szczepy pałeczek mlekowych hydrolizowały wszystkie zastosowane w doświadczeniu substraty. Jednak każdy szczep charakteryzował się różnym poziomem aktywności poszczególnych aminopeptydaz (od 3,00 do 13,75 JA). Porównując aktywność dipeptydaz syntetyzowanych przez badane szczepy Lactobacillus stwierdzono, że większość zastosowanych w doświadczeniu substratów, typowych dla bakterii fermentacji mlekowej, była hydrolizowana - jednak w różnym stopniu (od 1,08 do 7,25 JA). Najwyższą aktywnością, zarówno amino- jak też dipeptydaz, charakteryzował się szczep L. casei. Oceniany szczep L. acidophilus syntetyzował aminopeptydazy o prawie 2-krotnie mniejszej aktywności w porównaniu z pozostałymi szczepami oraz dipeptydazy o aktywności mniejszej niż w przypadku L. casei, ale porównywalnej z L. casei ssp. rhamnosus. Wysoka aktywność peptydazowa badanych szczepów Lactobacillus świadczy o ich potencjalnej przydatności w technologii serów dojrzewających. (abstrakt oryginalny)
Różnorodność procesów mikrobiologicznych i biochemicznych podczas dojrzewania sera, wzajemne pomiędzy nimi zależności oraz zmienność w czasie utrudniają monitorowanie procesów proteolizy i peptydolizy. Z tego powodu w różnych ośrodkach naukowych realizowane są badania nad opracowaniem wiarygodnych metod monitoringu proteolizy podczas dojrzewania różnego typu serów. Oceniając degradację parakazeiny podczas dojrzewania sera Gouda stwierdzono odmienną dynamikę formowania niskocząsteczkowych związków azotowych. Podczas 6 tygodni dojrzewania przyrosty zawartości N-peptydowego, N-aminokwasowego i N-aminowego wynosiły odpowiednio 280,4; 304,6 i 242,0%. Natomiast przyrosty zawartości peptydów rozpuszczalnych w 2- i 12-procentowym TCA były zdecydowanie mniejsze i wynosiły odpowiednio: 167 oraz 153,8%. Nie stwierdzono korelacji między zawartością N-rozpuszczalnego, peptydów rozpuszczalnych w 2- i 12- procentowym TCA oraz zawartością niskocząsteczkowych związków azotowych w serach podczas dojrzewania. Natomiast w serach dojrzałych zawartość N-peptydowego i N-aminowego była skorelowana z zawartością N-rozpuszczalnego w pH 4,6. Z kolei zawartość N-aminokwasowego nie była skorelowana z ilością N-rozpuszczalnego, ale korelowała z ilością peptydów rozpuszczalnych w 2- i 12-procentowym TCA. Metody alternatywne z 2- i 12-procentowym TCA mogą być zatem przydatne do porównywania zakresu i głębokości proteolizy w dojrzałych serach typu holenderskiego. Natomiast w ocenie dynamiki proteolizy podczas dojrzewania sera bardziej przydatny jest tradycyjny (chociaż praco- i czasochłonny) sposób frakcjonowania różnych form związków azotowych i ich oznaczanie odwoławczą metodą Kjeldahla. W odróżnieniu od serów typu holenderskiego, w serach Cheddar proteoliza i peptydoliza przebiegała znacznie wolniej i równomiernie - w związku z mniejszą aktywnością wody i stałym składem chemicznym w całej masie sera. Umożliwia to stosowanie metod alternatywnych do monitoringu proteolizy podczas dojrzewania sera Cheddar.
CD44 is a widely distributed type I transmembrane glycoprotein and functions as the major hyaluronan receptor on most cell types. CD44 through interaction with actin cytoskeleton affects the transmission of signals from the outside to the inside of the cell in many tissues and organs. Primary cultures of astrocyte are diverse in their morphology and many factors can influence on it. In vivo astrocyte also are able to change their shape in response to various stimuli. The appearance of reactive astrocytes in vivo with thicker and longer processes and increased cellular content of glial fibrillary acidic protein (GFAP) has been observed in the CNS after various types of injury caused by physical, chemical, and pathological trauma. Furthermore, it has been showed that CD44 expression increases after brain injury. In our study we investigated the influence of knock down of CD44 by specific shRNA and CD44 overexpression on the astrocytes shape changes. Our results indicate that knock down of CD44 in astrocytes results in more regular and flat shape. In contrast the overexpression of CD44 promotes more irregular, radial-like shape of astrocyte. Our data support the hypothesis that CD44 plays role in morphological changes of astrocyte and give the opportunity to investigate its role in pathological processes such as brain injury.
INTRODUCTION: CD44 adhesion molecule is highly expressed in astrocytes but its role in these cells is unknown. Recently a novel function of astrocytes in the brain in synapse phagocytosis has been described but the molecular mechanisms underlying these processes remain largely unknown. Phagocytic receptors MEGF10 and MERTK have been shown to be involved in this phenomenon. However, CD44 was shown to act as phagocytic receptor in macrophages. We hypothesized that CD44 can regulate phagocytosis in astrocytes and can be involved in synapse elimination. To investigate the role of CD44 in astrocyte-mediated synapse pruning, we used an in vitro engulfment assay, where astrocytes were cultured in the presence of synaptoneurosomes. We investigated whether altered CD44 expression level in astrocytes influence the efficiency of engulfement of synaptoneurosomes conjugated with a pH‑sensitive fluorescent dye. AIM(S): The aim of our work was to determine whether CD44 protein regulates synapse phagocytosis by astrocytes in vitro. METHOD(S): To check if CD44 regulates synapse phagocytosis by astrocytes we used primary astrocytes cultures in vitro that were transfected with specific CD44shRNA to knockdown CD44 expression or controls (empty pSuper). Astrocytes were cultured in the presence of synaptoneurosomes conjugated with pHrodo fluorescent dye. The amount of synaptoneurosomes engulfed by astrocytes were monitored in living cells with the use of confocal microscopy. Three-dimentional reconstructions of astrocytes and analysis of engulfed puncta were performed using Imaris software. Live imaging of transfected cells before and after incubation with fluorescently labaled synaptoneurosomes were performed. RESULTS: We observed significantly higher number of engulfed puncta inside CD44 depleted cells comparing to controls. CONCLUSIONS: Our results suggest that CD44 inhibits phagocytosis of synaptoneurosomes by astrocytes. FINANCIAL SUPPORT: The work was supported by the National Science Center grant No 2015/17/B/ NZ4/02540.
Dendritic arborization patterns define neuronal subtypes, and have important functional implications, determining how signals coming from individual synapses are integrated. Developing dendrites of neurons are responsive to extrinsic signals. Although several secreted proteins, cell surface receptors and adhesion molecules have been recently shown to be involved in dendrite morphogenesis, the role of extracellular matrix (ECM) components and molecular mechanisms of signal transduction from ECM to the neuronal cells involved in these processes are still poorly understood. The main component of the ECM in the brain is hyaluronan (HA). The major receptor for hyaluronan is CD44 adhesion molecule which mediates the response of cells to their extracellular microenvironment. The aim of this study was to investigate the role of CD44 in regulation of dendritic tree arborization. First, we examined the expression pattern of CD44 at the protein and RNA level in the rat brain by immunohistochemical, in situ hybridization and in situ PCR assays. All our experimental approaches clearly point to the neuronal localization of CD44, in addition to widely accepted presence in glia. Next, we investigated the role of CD44 in the hippocampal neurons cultured in vitro using the shRNA technology and anti-CD44 function-blocking antibody. The morphometric analysis show that cells with diminished expression of CD44 have more complex dendritic tree then control cells. Moreover, we have shown that treatment of neuronal cells with CD44 blocking antibody caused activation of small Rho GTPases (Cdc42, Rac1 and RhoA), which were previously shown to regulate dendritic tree arborization. These observations indicate that the members of small Rho GTPase family can be downstream effectors of CD44 in neuronal cells. The results of our experiments point to the importance of CD44 protein for the development of dendritic tree.
Focal cortical dysplasia (FCD) is a developmental brain disorder characterized by abnormalities of cytoarchitecture and neuronal morphology. FCD is associated with pharmacologically intractable forms of epilepsy in both children and adults. The mechanisms that underlie FCD-associated seizures are unclear. It is believed that a pathological plasticity, including abnormality of synaptic connections, plays the crucial role in this disease. Recent studies indicate the role of interactions between nerve cells and the extracellular matrix in the processes of plasticity. Matrix metalloproteinases are enzymes, which are able to degrade the extracellular matrix components, so they can play an important role in these interactions. Results of experiments using rodent models showed that extracellular matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) can play an important role in epileptogenesis. There is no data demonstrating that MMP-9 is involved in the development of epilepsy in human. The aim of this study was to determine whether MMP-9 might play a role in FCD - related epilepsy. Expression of MMP-9 was investigated in human brain tissue derived from people suffering from epilepsy. The immunohistochemistry and antibody microarray methods were used. The control group consisted of the autopsy brain samples. The results indicate that the expression of MMP-9 in the human brain tissue with FCD is increased. The highest immunoreactivity occurs in cytoplasm of abnormal neurons. Moreover, among the 7 tested matrix metalloproteinases (MMP-1, MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-10, MMP-13), MMP-9 is present in greatest concentration in the FCD tissue homogenates. The results support the hypothesis of the possible role of MMP-9 in the development of human epilepsy and give an opportunity to develop new treatments.
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 1 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.