Z liści Cymbidium aloifolium wyizolowano dwa częste wirusy storczyków. Przenosiły się one przez mechaniczną inokulację na różne gatunki roślin wskaźnikowych. U siedmiu z nich obserwowano wyłącznie zakażenia lokalne. Były to: Chenopodium quinoa, Datura stramonium, Gomphrena globosa, Nicotiana glutinosa, Nicotiana tabacum ‘Xanthi’ nc., Tetragonia expansa. Na elektronogramach obserwowano cząstki wirusowe w postaci pałeczek długości 200-300 nm lub 400-500 nm. Powyższe cechy, a także wyniki testu serologicznego pozwoliły przyjąć obecność ORSV i CyMV w chorych okazach tego storczyka.
Badano możliwość odwirusowania porażonych wirusem pierścieniowej plamistości odontoglossun (ORSV) roślin cymbidium w warunkach in vitro. Kultury zainicjowano z merystemów wierzchołkowych pobieranych z roślin z bardzo silnymi objawami systemicznymi z potwierdzoną infekcją. Zregenerowane z protokormów rośliny prowadzono przez 7 lat w warunkach in vitro wielokrotnie pasażując na pożywki, do których dodano 3 różne dawki Virazolu (10, 25 i 30 ppm). Zdrowotność roślin po 1 roku kultury in vitro, po kolejnych 7 latach w szkle i w 4 następnych latach wzrostu w szklarni sprawdzano metodą biologiczną oraz testem DAS ELISA. Najwięcej zdrowych roślin otrzymano przy 30 ppm Virazolu (81%).
Materiałem doświadczalnym był blado-fioletowo kwitnący mieszaniec Cattleya waltersiana x C. marone pochodzący z Ogrodu Botanicznego UJ, porażony wirusem pierścieniowej plamistości Odontoglossum (ORSV). Materiał ten został wprowadzony w warunki kultury in vitro przez izolację merystemów z wierzchołków wzrostu pędów (wielkości około 2-4 mm), a następnie namnażany w formie kultury pędowej na pożywce MS w modyfikacji Kozak [1991]. Kulturę prowadzono w stałej temperaturze 25°C±2°C, przy wilgotności względnej wynoszącej około 70%, w warunkach fotoperiodu 16/8 godz. (dzień/noc) i natężeniu promieniowania światła białego wynoszącego 80 µmol·m⁻²·s⁻¹, pasażując w 8-tygodniowych cyklach. Po 14 miesiącach kultury na niektórych eksplantatach pędowych wykształciły się spontanicznie drobne zniekształcone kwiaty. Kwitnące w kulturach in vitro pędy charakteryzowały się brakiem wyraźnych zmian u liści, jednakże kwiaty nie były w pełni wykształcone morfologicznie. Najokazalsza część okwiatu odpowiadała warżce osłaniającej niedokształcony prętosłup. Wybarwienie kwiatów było zbliżone do wybarwienia okazałych kwiatów roślin donorowych prezentujących typowe dla obecności tego wirusa rozbicie barwy. Ich zakwitanie mogło być wywołane wysokim poziomem cytokinin lub/i obecnością ORSV.
The study investigates the chemotherapeutic effect of plant growth regulators in eradicating mixed infection with Cymbidium mosaic (CyMV) and Odontoglossum ringspot viruses (ORSV) from Cattleya schönbrunnensis x C. leopoldii gutata. The experiment was designed to test a range of concentrations of 6-benzylaminopurine, kinetin and zeatin added to the basal medium on proliferating Cattleya mericlones. The results indicate that to eliminate CyMV from tissue cultures the best protocol for adding plant growth regulators was induction with 3.2 mg l-1 kinetin added to modified MS medium and then further propagation on 0.2 mg l-1 zeatin. This treatment was advantageous in terms of micropropagation. Micropropagation on basal medium supplemented with 5.0 mg l-1 BA after induction with 0.5 mg l-1 zeatin also effectively eliminated CyMV from cultures of the Cattleya hybrid. Infection with ORSV virus persisted in all treatments.
The effect of light wavelength on multiplication, tissue growth and pigment content was studied in Cattleya intermedia x C. aurantiaca microcutting cultures. The initial explants were shoots regenerated from protocorm-like bodies. Modified MS medium containing 5.0 mg·l-1 BA, 0.2 mg·l-1 zeatin and 1.0 mg·l-1 NAA, solidified with Difco agar, was used for adventitious regeneration of shoots and aerial roots. The rate of organ initiation depended on the wavelength of the monochromatic light applied. Red and blue treatments were effective in triggering photomorphogenesis in the evaluated material. The propagation coefficient reached 11.7 under red light, 10.6 under blue, 8.3 under white and 6.2 in darkness. Total chlorophyll and carotenoid content were highest in cultures illuminated with white light, gradually decreasing from the blue to the red and the far red treatments. Blue light treatment improved the efficiency of micropropagation and benefitted initiation of rhizogenesis and aerial root elongation, and the resulting plants were true to type.
Licznie występujące w naturalnych warunkach gatunki Cattleya rozwijają się najlepiej w świetle rozproszonym. Mieszaniec C. intermedia x C. aurantiaca został przeniesiony do warunków kultury in vitro przez izolację merystemów z wierzchołków wzrostu pędów poprzez fazę ciał protokormopodobnych a następnie namnażany w formie kultur pędowych na zmodyfikowanej pożywce MS z dodatkiem 2,0 mg·dm⁻³ siarczanu adeniny, 9,7 mg·dm⁻³ kwasu askorbinowego, 0,2 mg·dm⁻³ zeatyny, 4,95 mg·dm⁻³ BA, i 1,0 mg·dm⁻³ NAA, 3,0 g·dm⁻³ sacharozy i 8,0 g·dm⁻³ agaru Difco. Kulturę prowadzono w stałej temperaturze 25°C±2°C, w warunkach fotoperiodu 16/8 godz. Jako źródło światła stosowano monochromatyczne lampy firmy Philips TLD 36W o długości fal 360-450 nm oraz, w przypadku kontroli, lampy firmy Tungsram 40W F33 o białej barwie światła. Natężenie promieniowania światła białego na poziomie kultury wynosiło 60 µmol·m⁻²·s⁻¹. Naświetlanie kultur pędowych ultrafioletem wywołało ograniczenie liczby oraz świeżej masy regenerowanych pędów przybyszowych. Na większości pędów uzyskanych w trakcie mikrorozmnażania nastąpiła spontaniczna regeneracja korzeni powietrznych. W kulturach eksponowanych na światło UV-A świeża masa zregenerowanych korzeni była istotnie niższa w porównaniu z kontrolą. Organy wegetatywne zregenerowane w trakcie kultury w ultrafiolecie nie odbiegały od kontroli pod względem budowy morfologicznej, pomimo iż osiągały znacznie mniejsze rozmiary. Natomiast wyraziste różnice dotyczyły budowy anatomicznej liści regenerowanych w trakcie naświetlania UV-A i liści roślin kontrolnych. Ultrafiolet spowodował przerost komórek epidermy liści, zaburzenia w procesie różnicowania mezofilu i zniekształcenie struktury elementów waskularnych, przy jednoczesnym ograniczeniu liczby wiązek przewodzących w liściu. Stężenie barwników fotosyntetycznych czynnych u roślin naświetlanych promieniowaniem zakresu UV-A było znacząco niższe względem roślin kontrolnych naświetlanych światłem białym.
In this paper we report the research on the effect of the different light in vitroconditions on growth and development of interspecific hybrid Cattleya intermedia × C. aurantiaca (Orchidaceae) maintained as stock in vitro shoot culture. Callus was obtained from shoots explants on initiation medium which was composed of MS mineral salts and vitamin set, supplemented with 30 g l-1 sucrose, 2.0 mg dm-3 adenine sulphate, 9.7 mg dm-3 ascorbic acid, with addition of 1.0 μM TDZ, whereas callus maintenance medium was instead supplemented with 4.95 μM BA, and 1 μM NAA. Proliferating protocorm-like bodies (PLBs) of that precious plant material were exposed to the irradiation with mono-chromatic light characterized by different wavelength. Some interesting lines have been obtained on white, blue, red, far red, and ultraviolet light respectively, which proved to be diversified in the proliferation rates as well as in the morphological and anatomical features. The light treatment also significantly affected regenerative potential of studied culture. Blue light applied during two subsequent culture passages was proved to be the best option in order to regenerate shoots via PLBs. Nevertheless blue, red and far red irradiation of cultures led to distinctive reduction in the content of chlorophyll and carotenoid pigments, compared with culture irradiated with either white or ultraviolet light.
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.