Trwalosc elektronomikroskopowych i immunoelektronomikroskopowych preparatow wirusow roslin negatywowo kontrastowanych octanem uranylu oraz praktyczny aspekt stosowania tego 'barwnika'

• Autorzy: Szyndel M
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Przygotowane w latach 1983-87 preparaty elektronomikroskopowe wirusów należących do grup: tobamo, potex, carla, poty, clostero, como, cucumo, ilar, luteo i cryptowirusów przechowywano w temp. pokojowej. Preparaty przygotowano immunoelektronomikroskopowymi technikami zbrylania, ISEM i dekoracji oraz zmodyfikowaną techniką „leaf-dip". Wszystkie preparaty kontrastowano 2% wodnymroztworem octanu uranylu, pH 4,2. Badane preparaty mimo długiego okresu przechowywania okazały się bardzo trwale i zachowały wysoką jakość. Przedyskutowano wady i zalety octanu uranylu jako „barwnika" oraz określono warunki jego stosowania.

EN

The electron microscopic preparations of tobamo-, potex-, carla-, poty-, clostero-, como-, cucumo-, ilar-, luteo- and cryptoviruses were completed in 1983-87 and stored at room temp. Grids were prepared by immunoelectron microscopic (clumping, ISEM, decoration) techniques and by leaf-dip modified method. All preparations were contrasted with 2 % aqueous uranyl acetate (UA), pH 4,2. Reexaminated grids were still of good quality. UA gives high contrast, high resolution and good preservation of the virus particles and a clear image of serological reactions. The advantages and disadvantages of UA and some practical aspects of using this stain are discussed.

Słowa kluczowe

PL

kontrastowanie; preparaty wirusowe; preparaty immunoelektronomikroskopowe; biopreparaty; preparaty elektronomikroskopowe; octan uranylu; mikroskopia elektronowa; kontrastowanie negatywowe

EN

virus preparation; biopreparation; uranyl acetate; electron microscopy

• Wydawca: -
• Czasopismo: Acta Agrobotanica
• Rocznik: 1992
• Tom: 45
• Numer: 1-2
• Opis fizyczny: s.51-59,tab.,fot.,bibliogr.

Twórcy

autor

Szyndel M

• Szkola Glowna Gospodarstwa Wiejskiego, Warszawa

Bibliografia

• Boccardo G., Lisa V., Luisoni E., Milne R. G., 1987. Cryptic plant viruses. Adv. Virus. Res. 32: 171-214.
• Brenner S., Horne R. W., 1959. A negative staining method for high resolution electron microscopy of viruses. Biochem. Biophys. Acta 34: 103-110.
• Christie S. R„ Purcifull D. E., Crawford W. E., Ahmed N. A., 1987. Electron microscopy of negatively stained clarified viral concentrates obtained from small tissue samples with appendices on negative staining techniques. Bull. 872. Inst. Food and Agr. sei. Univ. Florida: 45.
• Hitchborn J. H., Hills G. J., 1965. The use of negative staining in the electron microscopic examination of plant viruses in crude extracts. Virology 27: 528-540.
• Horne R. W., 1967. Negative staining methods. [In]: Techniques for electron microscopy. D. Kay (ed.) Blachwell Sci. Public. Oxford: 328-355.
• Ko N. I., 1981. Application of VaMo negative staining for detecing plant viruses. Plant Prot. Bull. Taiwan 23: 153-156.
• Milne R. G., 1980. Immunoelectron microscopy (IEM) of plant viruses. Inst. Fitovirologia del CNR, Torino. Notes for the course: 18.
• Milne R. G., 1984. Electron microscopy for the identification of plant viruses in vitro preparations. [In]: Methods in virology. K. Maramorosch andH. Koprowski (ed.) Academic Press, New York, tom 7: 87-120.
• Milne R. G., Luisoni E., 1975. Rapid high-resolution immune electron microscopy of plant viruses. Virology 687: 270-274.
• Milne R. G., Luisoni E„ 1977. Rapid immune electron microscopy of virus preparations. [In]: Methods in virology. K. Maramorosch and H. Koprowski (ed.). Academic Press, London, tom 6: 256-281.
• Milne R. G., Lesemann D. E., 1984. Immunosorbent electron microscopy in plant virus studies. [In]: Methods in virology. K. Maramorosch and H. Koprowski (ed.). Academic Press, New York, tom 8: 85-101.
• Nermut M. V., 1972. Negative staining of viruses. J. Microsc. 96: 351-362.
• Roberts I. M., 1977. Negative staining in electron microscope serology. Micron 8: 215-216.
• Roberts I. M., 1986. Practical aspects of handling, preparing and staining samples containing plant virus particles for electron microscopy. [In]: Developments and application in virus testing. R.A.C. Jones and L. Torrance (ed.), Wellesbourne, Assoc. Appl. Biol. 1: 213-243.
• Roberts I. M., 1988. The structure of particles of tobacco ringspot nepovirus: evidence from electron microscopy. J. gen. Viol. 69: 1831-1840.
• Szyndel M. S., 1991. The suitability of different immunoelectron microscopy techniques in serological investigations of carlaviruses. [In]: Virus diseases of plants. SGGW (ed.), Proc. 20th Conf. Polish Plant Virol. Warsaw, 22-23 Oct. 1987: 63-72.
• Zaitlin M., Israel H. W., 1975. Tobacco mosaic virus. CMI/AAB Deser. Plant Viruses nr 151.