Preferencje help
Widoczny [Schowaj] Abstrakt
Liczba wyników

Znaleziono wyników: 39

Liczba wyników na stronie
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników

Wyniki wyszukiwania

help Sortuj według:

help Ogranicz wyniki do:
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
Recent years have seen a great increase of interest in application of molecular biology methods (hybridization of nucleic acids, polymerase chain reaction and ligase chain reaction) in the diagnostics of plant bacterial diseases. These methods are incomparably more sensitive than the traditional and the serological ones, thus making possible detection and correct identification of even low number of bacteria and, what 18 most important, results are obtainable in a significantly shorter time - even in a few hours. The paper reviews the most recent literature concerning applications of molecular methods to detection of bacteria belonging to genus: Agrobacterium, Clavibacter, Erwinia, Pseudomonas and Xanthomonas. A serious disadvantage of these methods is their high cost resulting from the need for expensive laboratory equipment and chemicals. Another drawback is the use of hazardous materials such as ethidium bromide (PCR) and radioactive isotopes (hybridization, LCR). Nevertheless, the molecular methods are more and more commonly used in phytopathological laboratories, especially in those examining quarantine objects. They are particularly useful as an assisting tool when results of traditional and serological tests are equivocal.
Xanthomonas hortorum pv. pelargonii (X. h. pv. pelargonii) jest sprawcą bakteryjnej zarazy pelargonii, zaliczanej do najbardziej szkodliwych chorób pelargonii rabatowych i bluszczolistnych. Z roślin Pelargonium x hortorum z objawami choroby, pochodzących z gospodarstw ogrodniczych zlokalizowanych w województwie dolnośląskim i mazowieckim, wyizolowano bakterie, które tworzyły na pożywce YNA bladożółte, błyszczące, śluzowate kolonie. Wyselekcjonowane 2 izolaty powodowały w teście patogeniczności na roślinach pelargonii typowe objawy zarazy. Podjęto próbę opracowania metody wykrywania X. h. pv. pelargonii w materiale roślinnym z zastosowaniem techniki PCR i pary specyficznych starterów XcpM1, XcpM2. Testowano 2 sposoby przygotowywania próbki i izolacji bakteryjnego DNA. Stwierdzono, że po 2-dniowej preinkubacji wyosobnionych z roślin bakterii na pożywce YNA, wykrycie X. h. pv. pelargonii w różnych częściach rośliny (pędy, ogonki i blaszki liściowe) było możliwe, zarówno gdy DNA izolowano na kolumnach Genomic Mini (A&A Biotechnology), jak i metodą termicznej ekstrakcji.
W pracy oceniano specyficzność 2 par starterów (XcpM1, XcpM2 i SMf, SMr) oraz przydatność 3 metod izolacji i oczyszczania DNA (na kolumnach Genomic Mini, metodą lizy alkalicznej i inkubacji w 100°C) do testów PCR na obecność X. h. pv. Pelargonii. Wysoką specyficzność wykrywania DNA tylko szczepów i izolatów X. h. pv. pelargonii uzyskano w wyniku reakcji PCR z zastosowaniem tylko jednej pary starterów - XcpMl i XcpM2. Najwyższą czułość wykrywania X. h. pv. pelargonii w materiale roślinnym (101 jtk·ml-1) obserwowano po wstępnej, 24-godzinnej inkubacji maceratu roślinnego na pożywce YNA. W przypadku detekcji patogena bezpośrednio w ekstrakcie roślinnym czułość reakcji PCR była niższa i zależała od sposobu izolacji DNA. Najwięcej bakterii (103-104 jtk·ml-1) wykrywano, gdy DNA oczyszczano metodą lizy alkalicznej, 100-krotnie mniej po zastosowaniu kolumn Genomie Mini (A&A Biotechnology). W przypadku izolacji DNA poprzez inkubację w 100°C nie obserwowano żadnych produktów amplifikacji. Przy użyciu starterów XcpM1 i XcpM2 w reakcji PCR z DNA bakterii izolowanym i oczyszczanym na kolumnach jak również metodą lizy alkalicznej było możliwe wykrycie patogena we wszystkich próbach zbiorczych składających się z 10, 50, 100 i 200 pojedynczych próbek (0,5 cm fragmentów ogonków) pochodzących ze zdrowych roślin, i jednej pobranej z rośliny porażonej X. h. pv. pelargonii.
W 2007 roku, obserwowano zespół objawów chorobowych na 15-letnich roślinach leszczyny różnych odmian uprawianych w centralnej Polsce. Były to duże, nieregularne brązowe nekrozy na liściach, skorupie i okrywie owocowej oraz zamieranie pędów. W 2009 roku, podobne objawy wykryto w tym samym sadzie, ale występowały one tylko na liściach. Natomiast na pobliskiej plantacji, gdzie rosły 4-letnie rośliny leszczyny odmiany Webba obserwowano nekrozy na pędach, zamieranie pąków i brązowe nekrotyczne plamy na liściach na prawie wszystkich roślinach. Z próbek pobranych z chorych organów wyizolowano bakterie, które tworzyły żółte kolonie na pożywkach YPGA i KingB. Spośród 20 wybranych izolatów, DNA piętnastu dawało charakterystyczny produkt w wyniku amplifikacji ze starterami X1X2 - specyficznymi dla rodzaju Xanthomonas. Na podstawie analiz: 27 cech fenotypowych, kwasów tłuszczowych, sekwencji genu gyrB, profili BOX, ERIC i REP-PCR oraz testów patogeniczności stwierdzono, że obserwowane zmiany chorobowe były powodowane przez Xanthomonas arboricola pv. corylina - sprawcę bakteryjnej zgorzeli leszczyny. Jest to pierwsze doniesienie o występowaniu tej patogenicznej bakterii w Polsce.
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.