Application of ultraviolet spectroscopy to discriminate wheat alpha-beta- and gamma-gliadins separated with high-performance liquid chromatography - a short report

• Autorzy: Dziuba J. , Nalecz D. , Minkiewicz P. , Hanasiewicz A.

Warianty tytułu

PL

Zastosowanie spektroskopii w nadfiolecie do rozrozniania alfa-beta- i gamma-gliadyn pszenicy rozdzielonych metoda wysokosprawnej chromatografii cieczowej - krotki komunikat

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Studies were carried out to identify and detect potentially toxic proteins of wheat. The gliadin fractions were subjected to chromatographic and spectroscopic analyses to develop the relevant discriminants. The spectral analysis showed that these proteins differ considerably in their tryptophan-to-tyrosine molar ratios. A standard curve was used. The gliadin fractions were identified by comparing the calculated values of the tryptophan-to-tyrosine molar ratio with the values obtained based on the amino acid sequence of wheat gliadins in the Swiss-Prot/TrEMBL database. Based on the retention times and second derivatives of UV spectra, the particular wheat gliadin fractions were classified as α/β or γ-gliadins.

PL

Celem badań była identyfikacja i wykrywanie potencjalnie toksycznych białek pszenicy. Badania obejmowały chromatograficzno-spektroskopową analizę frakcji prolaminowej białek pszenicy, w tym rozdział chromatograficzny (RP-HPLC) i opracowanie wyróżników chromatograficzno- spektralnych. Analiza spektralna chromatograficznie rozdzielonych frakcji gliadyn pszenicy wykazała, że są to białka różniące się znacznie stosunkiem molowym aminokwasów aromatycznych tryptofanu (Trp) do tyrozyny (Tyr). Do obliczania stosunku molowego Trp/Tyr wykorzystano drugie pochodne widm UV poszczególnych frakcji. Identyfikacji frakcji gliadynowych dokonano porównując obliczone wartości stosunku molowego tryptofanu do tyrozyny z wartościami otrzymanymi na podstawie sekwencji aminokwasowych gliadyn pszenicy dostępnych w bazie danych Swiss-Prot/TrEMBL. Na podstawie czasów retencji oraz drugich pochodnych widm UV sklasyfikowano poszczególne frakcje gliadyn pszenicy jako α/β- lub γ-gliadyny.

Słowa kluczowe

EN

gliadin; wheat gliadin; aromatic amino acid; gliadin protein; ultraviolet spectroscopy; high performance liquid chromatography; application; separation

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 2007
• Tom: 57
• Numer: 2
• Opis fizyczny: p.191-193,fig.,ref

Twórcy

autor

Dziuba J.

• University of Warmia and Mazury in Olsztyn, Pl.Cieszynski 1, 10-726 Olsztyn, Poland

autor

Nalecz D.

autor

Minkiewicz P.

autor

Hanasiewicz A.

Bibliografia

• 1. Arangoa M.A., Campanero M.A., Popineau Y., Irache J.M., Evaluation and characterization of gliadin nanoparticles and isolates by reversed–phase HPLC. J. Cereal Sci., 2000, 31, 223–228.
• 2. Bean S.R., Bietz J.A., Lookhart G.L., High-performance capillary electrophoresis of cereal proteins. J. Chromatogr. A, 1998, 814, 25–42.
• 3. Bietz J.A., Burnouf T., Cobb L.A., Wall J.S., Gliadin analysis by reversed-phase high-performance liquid chromatography: Optimization of extraction conditions. Cereal Chem., 1984, 61, 124–129.
• 4. Dziuba J., Darewicz M., Minkiewicz P., Panfil T., Application of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and reversed-phase high-performance liquid chromatography on-line with the second and fourth derivatives UV spectroscopy in identification of β-casein and its peptide fractions. Milchwissenschaft, 2002, 57, 497–502.
• 5. Dziuba J., Nałęcz D., Minkiewicz P., Reversed-phase high-performance liquid chromatography on-line with the second and fourth derivative ultraviolet spectroscopy as a tool for identification of milk proteins. Anal. Chim. Acta, 2001, 449, 243–252.
• 6. Dziuba J., Nałęcz D., Minkiewicz P., Identification and determination of milk and soybean protein preparations using enzymatic hydrolysis followed by chromatography and chemometrical data analysis. Anal. Chim. Acta, 2004, 521, 17–24.
• 7. Ferranti P., Mass spectrometric approach for the analysis of food proteins. Eur. J. Mass Spectrom., 2004, 10, 349–358.
• 8. Lookhart G.L., Bean S.R., Bietz J.A., Reversed-phase high-performance liquid chromatography in grain applications. Cereal Foods World, 2003, 48, 9–16.
• 9. Marchylo B.A., Hatcher D.W., Kruger J.E., Kirkland J.J., Reversed-phase high-performance liquid chromatographic analysis of wheat proteins using a new highly stable column. Cereal Chem., 1992, 69, 371–378.
• 10. Minkiewicz P., Dziuba J., Darewicz M., Nałęcz D., Application of high- performance liquid chromatography on-line with ultraviolet/visible spectroscopy in food science. Pol. J. Food Nutr. Sci., 2006, 15/56 (Suppl. 1), 145–153.
• 11. Minkiewicz P., Dziuba J., Niklewicz M., Protein homogeneity testing by reversed-phase high-performance liquid chromatography of reduced and non-reduced samples. Polimery, 2005, 50, 379–382.
• 12. Swiss-Prot/TrEMBL database: [http://www.expasy.org]. 13. Visser S., Slangen C.J., Rollema H.S., Phenotyping of bovine milk proteins by reversed phase high- performance liquid chromatography. J. Chromatogr., 1991, 548, 361–370.
• 14. Weiss W., Vogelmeier C., Görg A., Electrophoretic characterization of wheat grain allergens from different cultivars in bakers’ asthma. Electrophoresis, 1993, 14, 805–816.
• 15. Wieser H., Antes S., Seilmeier W., Quantitative determination of gluten protein types in wheat flour by reversed-phase highperformance liquid chromatography. Cereal Chem., 1998, 75,644– 649.