Proba uzyskania nowego szczepu winiarskiego na drodze elektrofuzji protoplastow

• Autorzy: Dzwonek M , Gniewosz M. , Duszkiewicz-Reinhard W.
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Przeprowadzono elektrofuzję protoplastów pomiędzy przemysłowym szczepem winiarskim Saccharomyces cerevisiae S.o./2 i szczepem S. cerevisiae rho- ATCC 38637, stosowanym do odkwaszania moszczów gronowych po zakończeniu fermentacji alkoholowej. W celu wytypowania markerów pozwalających na izolację fuzantów określono zdolność obu szczepów drożdży do asymilacji różnych źródeł węgla oraz do wzrostu na podłożach o podwyższonym stężeniu sacharozy lub cykloheksimidu. Przed procesem elektrofuzji optymalizowano protoplastyzację, stosując różne enzymy lityczne, dobierając odpowiednio ich dawki oraz kombinacje. Jednocześnie ustalono właściwe parametry przebiegu elektrofuzji. Z grupy fuzantów wybrano dwie stabilne hybrydy (F1 i F2) i poddano charakterystyce w kierunku określenia zawartości DNA w komórce, zdolności przemiany kwasu jabłkowego do kwasu mlekowego oraz produkcji etanolu. Otrzymane wyniki wskazują, że obydwa szczepy mają zwiększoną zawartość DNA w komórkach. Fuzanty prowadziły fermentację jabłczanowo-mleczanową o wydajności porównywalnej ze szczepem S. cerevisiae rho- ATCC 38637 i fermentację alkoholową na poziomie porównywalnym ze szczepem S. cerevisiae S.o./2.

EN

A protoplast electrofusion was carried out between two industrial wine-making strains: Saccharomyces cerevisiae S.o./2 and S. cerevisiae rho- ATCC 38637; the latter one is used to regulate acidity in grape wines after the completed alcoholic fermentation. For the purpose of selecting markers, which enable the isolation of fusants, there was determined the ability of the two strains to assimilate different types of carbon sources, as well as the their ability to grow on a medium with an increased content of saccharose and cycloheximide. Prior to starting the electrofusion process, the protoplastisation was enhanced by applying changing amounts and combinations of various types of lytical enzymes. Also, optimal parameters of the electrofusion process were determined. From a group of fusants, two stable hybrids (F1 and F2) were selected and described in order to determine the following parameters: DNA content in a cell, their ability to convert malic acid into lactic acid, and their potential to produce ethanol. The results obtained prove that the two strains investigated contain an increased content of DNA in cells. The yield of a malolactic fermentation as provided by the fusants was comparable to the yield of malolactic fermentation run by the strain S. cerevisiae rho- ATCC 38637, and the yield of the alcoholic fermentation run by these fusants was comparable to the alcoholic fermentation yield provided by the strain S.cerevisiae S.o./2.

Słowa kluczowe

PL

przemysl fermentacyjny; konferencje; protoplasty; hybrydy F1; fuzanty; elektrofuzja jablczanowo-mleczanowa; hybrydy F2; Saccharomyces cerevisiae; drozdze winiarskie; Krakow konferencja; fermentacja alkoholowa

EN

fermentation industry; conference; protoplast; F1 hybrid; fusant; electrofusion; F2 hybrid; Saccharomyces cerevisiae; wine yeast; Krakow conference; alcoholic fermentation

• Wydawca: -
• Czasopismo: Żywność Nauka Technologia Jakość. Suplement
• Rocznik: 2004
• Tom: 11
• Numer: 3
• Opis fizyczny: s.45-55,rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Dzwonek M

• Szkola Glowna Gospodarstwa Wiejskiego, ul.Nowoursynowska 159c, 02-776 Warszawa

autor

Gniewosz M.

autor

Duszkiewicz-Reinhard W.

Bibliografia

• [1] Chmiel A.: Biotechnologia - Podstawy mikrobiologiczne i biochemiczne. PWN, Warszawa 1991.
• [2] Gniewosz M., Raczyńska-Cabaj A., Duszkiewicz-Reinhard W., Stachura G.: Modification of wine yeasts from Saccharomyces cerevisiae by electrofusion of protoplasts. Pol. J. Food Nutri. Sci., 1999, 8/49, 17-25.
• [3] Kunicka A. Szopa J.S.: Metabolizm kwasu jabłkowego u drożdży z rodzaju Schizosaccharomyces i Saccharomyces. Biotechnologia, 1996, 1 (32), 151-161.
• [4] Kunicka A., Szopa J.S.: Otrzymywanie międzyrodzajowych hybrydów drożdży S. cerevisiae i S. pombe na drodze fuzji protoplastów. Biotechnologia, 1998, 1 (40), 165-177.
• [5] Lonvaud-Funel A.: Microbiology of the malolactic fermentation: molecular aspects. FEMS Microbiology Letters., 1995, 126, 209-214.
• [6] Maniatis T., Fritsch E.F., Sambrook J.: Molecular Cloning: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor, N.Y 1982.
• [7] PN-90/A-79120.04. Wina i miody pitne. Przygotowanie próbek i metody badań. Oznaczanie zawartości alkoholu etylowego.
• [8] Perez F., Regodon A., Valdes E. De Miguel C., Ramirez M.: Cycloheximide resistance as marker for monitoring yeast in wine fermentations. Food Microbiol., 2000, 17, 119-128.
• [9] Pretorius I.S., Bauer F.F.: Meeting the consumer challenge through genetically customized wine- yeast strains. Trends Biotechnol., 2002, 20 (10), 426-433.
• [10] Rose M.D., Winston F., Hieter P.: Methods in yeast genetics. A laboratory course manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1990.
• [11] Spencer J.F.T., Spencer D.M., Bizeau C., Vaughan A., Martini A.: The use of mitohondrial mutants in hybridisation of industrial yeast. Current Genetics, 1985, 9, 623-625.
• [12] Spencer J.F.T., Spencer D.M.: The use of mitohondrial mutants in hybridisation of industrial yeast. Current Genetics, 1981, 4, 177-180.
• [13] Szopa J.S., Gańczyk B., Kowal K., Zwoliński G.: Melibiose-fermenting osmotolerant Saccharomyces cerevisiae hybrids. Acta Alim. Pol., 1990, 16 (40), 3-4.
• [14] Wzorek W., Pogorzelski E.: Technologia winiarstwa owocowego i gronowego. Wkładka do miesięcznika Przem. Ferm. Owoc. Warz. Wyd. Sigma-NOT Sp. z o.o. Warszawa 1998.