Characteristics of lipolytic enzymes of rapeseeds

• Autorzy: Grabska J , Jedrychowski L. , Mierzejewska D.

Warianty tytułu

PL

Charakterystyka enzymow lipolitycznych nasion rzepaku

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Some properties of lipolytic enzymes of a microsomal fraction of two Polish varieties of rapeseed were qualified. Enzymes extracts were prepared front germinated rapeseeds of two varieties: double improved - Bolko and high erucic - Skrzeszowicki. The lipase was purified by ultracentifuge. The obtained supernatant was used to chracterise the lipase and further to purify by a column chromatography method, using the following carriers: Sephadex G-100, Sephacryl S-300, DEAE sephadex A-50 and Q Sepharose. Examined enzymatic extracts showed two optima of lipolytic activity: pH 7.5 and pH 9.0. The highest degree of hydrolysis of tributyrylglicerol (TC 4 : 0) revealed lipases of the Bolko variety seeds at 30°C, and lipases of the Skrzeszowicki seeds at 40°C. At the temperature 30 - 40°C lipases maintained approx. 89 % to 93 % of their maximum activity. However, at 25°C and 50°C their activity was reduced to approx 20 %. When the temperature was above 40°C, thermal inactivation of lipolytic enzymes from two varieties progressed in two stages. Examined lipases maintained 20 % to 30 % of their initial activity, after storing them for 1 h at 60°C. During the purification of lipases, carried out by a column chromatography method, the most favourable results were obtained using molecular filtration on Sephadex G-100 gel.

PL

Określono właściwości enzymów li politycznych frakcji mikrosomalnej nasion dwóch polskich odmian rzepaku. Ekstrakty enzymatyczne przygotowywano ze skiełkowanych nasion rzepaku dwóch odmian: podwójnie ulepszonej - Bolko i wysokoerakowej - Skrzeszowicki. Lipazę oczyszczano przez ultrawirowanie, a uzyskany supernatant zastosowano do scharakteryzowania lipazy i dalszego oczyszczania metodą chromatografii kolumnowej z wykorzystaniem następujących nośników: Sephadex G-100, Sephacryl S-300, DEAE Sephadex A-50 i Q Sepharose. Badane ekstrakty enzymatyczne wykazywały dwa optima aktywności lipolitycznej: pH 7.5 i pH 9.0. Najwyższym stopniem hydrolizy tributyryloglicerolu (TC 4 : 0) charakteiyzowały się lipazy z nasion odmiany Bolko w temperaturze 30°C, zaś lipazy z nasion odmiany Skrzeszowicki w temperaturze 40°C. W przedziale temperatur 30 - 45°C lipazy zachowywały od ok. 89 do 93 % swojej aktywności maksymalnej, a w temperaturach 25 i 50°C ich aktywność zmniejszała się o ok. 20 %. W temperaturach powyżej 40°C inaktywacja termiczna enzymów lipolitycznych obu odmian przebiegała dwufazowo. Badane lipazy zachowywały 20 % do 30 % aktywności początkowej po 1 godzinie przetrzymywania w temperaturze 60 °C. Podczas oczyszczania lipaz metodą chromatografii kolumnowej, najkorzystniejsze wyniki uzyskano stosując sączenie molekularne na żelu Sephadex G-100.

Słowa kluczowe

PL

rzepak; sklad chemiczny; nasiona; enzymy lipolityczne; rzepak Skrzeszowicki; rzepak Bolko; odmiany roslin

• Wydawca: -
• Czasopismo: Zeszyty Problemowe Postępów Nauk Rolniczych
• Rocznik: 1995
• Tom: 427
• Opis fizyczny: s.115-120,rys.,bibliogr.

Twórcy

autor

Grabska J

• Institute of Animal Reproduction and Food Research , PAN, ul.Tuwima 10, 10-718 Olsztyn

autor

Jedrychowski L.

autor

Mierzejewska D.

Bibliografia

• 1. Fuchs C., Hansen G.: Partial purification and some properties of Brassica napus lipase. Z. Naturforsch, 49, 293 - 301, 1994.
• 2. Grabska J., Jędrychowski L.: Methods of lipolytic activity estimation in the seed of oilseed (in Polish). Post. Nauk Roln., 6, 143 - 150, 1993.
• 3. Hassanien F. R., Mukherjee K. D.: Isolation of lipase from germinating oilseeds for biotechnological processes. JAOCS, 63(7), 893 - 897, 1986.
• 4. Hills M. J., Murphy D. J.: Characterization of lipases from the lipid bodies and microsomal membranes of erucic acid-free oilseed rape (Brassica napus) cotyledons. Biochem. J., 249, 687 - 693, 1988.
• 5. Huang A. H., Lin Y., Wang S.: Characteristics and biosynthesis of seed lipases in maize and other plant species. JAOCS, 6, 897 - 899, 1988.
• 6. Lawrence R., C., Fryer T. F., Reiter B.: Raid method for the quantitative estimation of microbial lipases. Nature, 1264 - 1265, 1967.
• 7. Lin Y., Huang A. H.: Lipase in lipid bodies of cotyledons of rape and mustard seedlings. Archiv. Biochem. Biophys., 225(1), 360 - 369, 1983.
• 8. O’Sullivan J. N., Hills M. J., Murphy D. J.: Purification and properties of lipase from oilseed rape (Brassica napus L.). Catabolism of lipids. Biochem. J., 313 - 315, 1990.
• 9. Price N. C.: Enzyme assays. In: A Practical Approch (Eds R. Eisenthal, M. J. Danson). Oxford University Press, Oxford-New York -Tokyo, 255 - 273, 1993.
• 10. Weselake R. J., Thomson L.W., Tenaschuk D., MacKenzie S. L.: Properties of solubized microsomal lipases from germinating Brassica napus. Plant Physiol., 91, 1303 - 1307, 1989.