Cloning of the DNA fragments reflecting the open reading frame I and II of the I-18 C gene of Chironomus tentans. IV. The ligation of the bluescript vector with the inserts

• Autorzy: Borowicz B P
• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The technology used for the cloning of the open reading frame (ORF) I and II reflecting DNA fragments of the I-18 C gene in regard to the ligation reactions of the bluescript vector with the inserts, is presented. The main steps include: the calculation of the molar ratio of the bluescript plasmid to the ORF I and II reflecting DNA fragments as the inserts, the ligation reaction, the transformation of the E. coli cells of the XL- 1 strain with the ligation reactions products and growing of the transformed bacterial cells.

PL

Przedstawiono technologię użytą do klonowania fragmentów DNA odzwierciedlających otwartą ramę odczytu I i II genu I-18 C Chironomus tentans w zakresie: reakcji ligacji wektora blueskrypt ze wstawkami sekwencji klonowanych wymienionych wyżej. Przedstawione główne etapy obejmują: obliczenie stosunku molarnego plazmidu blueskrypt do fragmentu DNA odzwierciedlającego otwartą ramę odczytu I i II. Fragmenty te zostały użyte jako wstawki. Przedstawiono także zastosowaną technologię dotyczącą reakcji ligacji, transformacji komórek bakteryjnych E. coli szczepu XL-1 produktami reakcji ligacji oraz hodowlę na płytkach agarowych stransformowanych komórek bakterii.

Słowa kluczowe

EN

pET-3a vector; promoter system; cloning; I-18 C gene; T7 RNA polymerase; Chironomus tentans; polymerase chain reaction; expression; DNA fragment

• Wydawca: -
• Czasopismo: Journal of Plant Protection Research
• Rocznik: 1999
• Tom: 39
• Numer: 1
• Opis fizyczny: p.54-58

Twórcy

autor

Borowicz B P

• Institute of Plant Protection, Miczurina 20, 60-318 Poznan, Poland

Bibliografia

• 1. Borowicz B.P. 1995. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame I of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. I. The technology for the preparation of the samples (in English). Prace Nauk, Inst. Ochr. Roślin 36 (1/2): 69-76.
• 2. Borowicz B.P. 1995. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame I of the I- 18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. II. The technology required to obtain the DNA fragment (in English). Prace Nauk. Inst. Ochr. Roślin 36 (1/2): 77-82.
• 3. Borowicz B.P. 1995. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame I of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. III. The effect of the applied technologies (in English). Prace Nauk. Inst. Ochr. Roślin 36 (1/2): 83-93.
• 4. Borowicz B.P. 1996. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. I. The technology for the preparation of the primers. J. Plant Protection Res., 37 (1/2), 138-144.
• 5. Borowicz B.P. 1996. lsolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. II. The technology for the preparation of the template. J. Plant Protection Res., 37 (1/2): 145-148.
• 6. Borowicz B.P. 1996. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. III. The DNA amplification technology. J. Plant Protection Res., 37 (1/2): 149-155.
• 7. Borowicz B.P. 1996. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymerase Chain Reaction. IV. The product of the applied technologies. J. Plant Protection Res., 37 (1/2): 156-164.
• 8. Borowicz B.P. 1996. Isolation of the DNA fragment reflecting the Open Reading Frame II of the I-18 C gene of Chironomus tentans by the Polymearse Chain Reaction. V. Different mechanisms of rcgulation regarding the Open Reading Frames. J. Plant Protection Res., 37 (1/2): 165-171.
• 9. Lezzi M., Lutz B., Dorsch-Haesler K. 1989 b. The ecdysterone-controlled chromosome region I-18 C in C. tentans: from cytology to molecular biology. Acta Biol. Debr. Oecol. Hung., 2: 129-139.
• 10. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. 1989. Molecular Cloning. A laboratory manual. Second Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, Books 1-3.
• 11. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. 1989. Plasmid Vectors (chapter 1) in Molecular Cloning. A laboratory manual. Second Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, Book 1: 1.2-1.11O.
• 12. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. 1989. Expression of Cloned Genes in Escherichia coli (chapter 17) in Molecular Cloning. A laboratory manual. Second Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, Book 3: 17.2-17.44.
• 13. Studier F.W., Rosenberg A.H., Dunn J.J., Dubendorff J.W 1990. Use of T7 RNA Polymerase to direct expression of cloned genes. Methods in Enzymology, Goeddel D.V. (ed.), 1985: 60-89.
• 14. Winnacker E.-L. 1987. From Genes to Clones. Introduction to Gene Technology (in English). VCH Verlags-gesellschaft mbH, D-6940 Weinheim, Germany: 1-634 pp.