Application of high-performance liquid chromatography on-line with ultraviolet-visible spectroscopy in food science

• Autorzy: Minkiewicz P. , Dziuba J. , Darewicz M. , Nalecz D.
• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The aim of the present review was to describe the application of diode-array detectors for the identification of HPLC-separated chemical compounds on the basis of their UV/Vis spectra. Diode-array detectors serve to identify compounds containing conjugated double bonds, especially aromatic compounds, and to evaluate their purity. This group of compounds includes: peptides and proteins (in that case aromatic amino acid residues are chromophores), anthocyanins and other flavonoids, other phenolic compounds, carotenoids and other dyes. The most simple strategy of interpreting UV/Vis spectra is to determine the location of absorbance maximum in zero order spectra (such a strategy is usually applied in dye analysis). The absorbance ratio at different wavelengths was used to identify and investigate structural changes in proteins and peptides. Chemometrical analysis of zero order spectra provides a basis for evaluating peak purity and choosing the background spectrum. Derivatives of spectra may be characterised via determination of convexity intervals, location of minima of second derivative, calculation of amplitudes of second and third derivatives or similarity indices between derivatives of individual spectra. The possibilities offered by UV/Vis spectroscopy cover, among others, discrimination between spectra of proteins with different contents of aromatic amino acids (mainly tyrosine and tryptophan), as well as discrimination between spectra of anthocyanins containing the same chromophore but different glycosidic moieties.

PL

Celem niniejszego przeglądu jest omówienie zastosowań detektorów fotodiodowych, związanych z identyfikacją związków chemicznych na podstawie widm UV-Vis. Detektory fotodiodowe służą do identyfikacji i oceny czystości związków chemicznych zawierających sprzężone wiązania podwójne, głównie związków aromatycznych. Do związków zawierających takie chromofory należą: peptydy i białka (chromoforami są w tym przypadku reszty aminokwasów aromatycznych), antocyjany i inne flawonoidy, inne związki fenolowe, karotenoidy i inne barwniki. Najprostszym sposobem interpretacji widm UV-Vis jest obliczenie maksimum absorbancji widma zerowego rzędu (taki sposób interpretacji widm jest stosowany przy charakterystyce barwników). Stosunek absorbancji przy różnych długościach fali był stosowany jako parametr identyfikacji i badania zmian struktury peptydów i białek. Chemometryczna analiza widm zerowego rzędu służy do oceny czystości pików chromatograficznych lub doboru widma tła. W analizie peptydów i białek skuteczną strategią jest zastosowanie pochodnych widm. Pochodne widm mogą być charakteryzowane poprzez obliczanie przedziałów wypukłości na podstawie pierwszej pochodnej widma, położenia minimów drugiej pochodnej, amplitud drugiej i czwartej pochodnej lub wskaźników podobieństwa między pochodnymi widm. Możliwości spektroskopii UV-Vis obejmują między innymi rozróżnianie widm UV peptydów i białek różniących się zawartością aminokwasów aromatycznych (głównie tyrozyny i tryptofanu) oraz rozróżnianie widm UV antocyjanów zawierających taki sam chromofor i różniących się strukturą reszty glikozydowej.

Słowa kluczowe

EN

food science; peptide; derivative spectroscopy; protein; high performance liquid chromatography

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 2006
• Tom: 15/56
• Numer: Spec.Issue 1
• Opis fizyczny: p.145-153,fig.,ref.

Twórcy

autor

Minkiewicz P.

• University of Warmia and Mazury in Olsztyn, Plac Cieszynski 1, 10-726 Olsztyn-Kortowo, Poland

autor

Dziuba J.

autor

Darewicz M.

autor

Nalecz D.