Ekstrakcja do fazy stałej i chromatograficzne oznaczanie hiperycyny w zielu dziurawca (Hypericum perforatum L.)

• Autorzy: Stochmal A , Gruszczyk M.
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Opracowano procedurę ekstrakcji do fazy stałej na mikrokolumnach C-18 (Sep-Pak, Waters). Sproszkowany materiał H. perforatum ekstrahowano za pomocą MeOH. Rozpuszczalnik odparowano, a zawiesinę wodną ekstraktu załadowano na Sep-Pak, przemyto 50% MeOH, a następnie wymyto hiperycynę stosując 70% MeOH. Próbkę odparowano w 40°C, rozpuszczono w MeOH i poddano analizie HPLC. System HPLC był wyposażony w Diode Array Detector (DAD) produkcji Waters. Próbki rozdzielano na kolumnie C-18 (Saulentechnik, 4.6 x 250 mm, 10 |im) z zastosowaniem mieszaniny rozpuszczalników H3P04-acetonitryl podawanej w następujący sposób: liniowy gradient 50% acetonitrylu do 100% w ciągu 10 min, a następnie acetonitryl (izokratycznie przez 10 min). Jako standard zastosowano hiperycynę (Sigma). Zarówno standard hiperycynowy, jak i próbki z H. perforatum wykazały dwa piki przy czasach retencji około 13 i 15 minut (prawdopodobnie hiperycyna oraz pseudohiperycyna) z prawie identycznymi widmami absorpcyjnymi w zakresie 200-600 nm. Powierzchnie obu pików zostały zsumowane i określono całkowite stężenie hiperycyny z krzywej kalibracyjnej. Przeanalizowano 20 próbek H. perforatum, w których całkowite stężenie hiperycyny wahało się między 1,16 a 9,34 mg/g s.m. Stosunek powierzchni pików hiperycyny do pseudohiperycyny mieścił się w granicach 1,36-3,49.

EN

Solid phase extraction procedure on C-18 microcolumns (Sep-Pak, Waters) was developed. Powdered H. perforatum material was extracted with MeOH. Solvent was evaporated and suspended in water extract was loaded to Sep-Pak, washed with 50% MeOH and hypericin was washed out with 70% MeOH. This was evaporated at 40°C, dissolved in MeOH and used for HPLC determination. For HPLC, Waters system with Diode Array Detector was used. Samples were separated on C-18 column (Saulentechnik, 4,6x250 mm, 10 um) using 1% H3P04-acetonitrile solvent system delivered in a following manner: linear gradient 50% acetonitrile to 100% during 10 min, followed by acetonitrile (isocratically, 10 min). Hypericin (Sigma) was used as a standard. Both hypericin standard and H. perforatum samples showed two peaks with retention times of about 13 and 15 minutes (presumably hypericin and pseudohypericin) with almost identical absorption spectra in the range of 200-600 nm. The areas of two peaks were summarised and total hypericin concentration was determined with calibration curve. Twenty samples of H. perforatum were analysed and total hypericin concentration ranged from 1.16-9.34 mg/g d.m. The area ratio of hypericin/pseudohypericin ranged from 1.36 to 3.49.

Słowa kluczowe

PL

surowce roslinne; fitochemia; ziola; Hypericum perforatum; analiza chromatograficzna; ekstrakcja; hiperycyna; dziurawiec

• Wydawca: -
• Czasopismo: Herba Polonica
• Rocznik: 1998
• Tom: 44
• Numer: 4
• Opis fizyczny: s.315-323, rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Stochmal A

• Instytut Uprawy, Nawozenia i Gleboznawstwa, Czartoryskich 8, 24-100 Pulawy

autor

Gruszczyk M.

Bibliografia

• 1. BOMBARDELLI E. i wsp.: Fitoterapia 1955, 66, 43.
• 2. DĘBSKA W., ŻMUDZIŃSKA I.: Herba Pol. 1982, 28, 21.
• 3. GÓRECKI P. i wsp.: Herba Pol. 1996, 42, 192.
• 4. KOHLMÜNZER S.: Farmakognozja. PZWL, Warszawa 1993.
• 5. BORKOWSKI B. i wsp. (Red.): Rośliny lecznicze w fitoterapii. Wyd. Inst. Rośl. Przetw. Ziel., Poznań 1994.
• 6. KUCERA M.: Cesk. Farm. 1958, 7, 436.
• 7. NEUEN G., LEBRETON P.: Arch. Pharm. Franc. 1964, 22, 69.
• 8. NEUWALD F., HAGENSTÖM U.: Arch. Pharm. 1955, 288, 38.
• 9. OLESZEK W.: J. Sci. Food Agric. 1988, 44, 43.