Method of obtaining a technical preparation of beta-galactosidase from Kluyveromyces lactis yeast NRRL-Y-1118

• Autorzy: Giec A.

Warianty tytułu

PL

Uzyskanie preparatu technicznego beta-galaktozydazy z drożdży Kluyveromyces lactis NRRL-Y-1118

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The active preparation of β-galactosidase was obtained from yeast Kluyveromyces lactis NRRL-Y-1118 cultivated on ultrafiltrates of whey. Extraction, two-fold precipitation with acetone and ultrafiltration leads to a fivefold purification of the enzyme its activity being regained in 65%. This enzyme preparation containing whey proteins had a marked stability at 4°C.

PL

Drożdże Kluyveromyces lactis hodowane na serwatce po ultrafiltracji z podwyższoną do 15% zawartością laktozy użyto jako źródło enzymu. Po dezintegracji komórek w homogenizatorze DYNO-MILL KDL f-my Bachofen enzym izolowano z surowych ekstraktów przez dwukrotne strącanie acetonem i ultrafiltracją (rys. 1). W wyniku takiego postępowania z 50 g drożdży uzyskano 1400 mg preparatu β-galaktozydazy o wysokiej aktywności 87000 J.A.G. (jednostek aktywności β-galaktozydazy-μmoli ONP uwolnionych z ONPG/min). W procesie oczyszczania nastąpił 5-krotny wzrost aktywności specyficznej enzymu przy jednoczesnym jego odzysku w granicach 65% (tabela 1). Uzyskany "enzym surowy" charakteryzował się złożonym składem białkowym w warunkach sączenia molekularnego na sefadeksie G-200 (rys. 2 i 3) i elektroforezy na poliakrylamidach (rys. 4). Trwałość enzymu przechowywanego w formie zliofilizowanej wzrastała wyraźnie po zmieszaniu go w stosunku 1 : 4 z białkami serwatki (tabela 2). Aktywność β-galaktozydazy w takim preparacie wynosiła 17000 J.A.G/g. W trakcie 2 lat przechowywania w 4°C utracił on jedynie ok. 16% aktywności (tabela 2).

• Wydawca: -
• Czasopismo: Acta Alimentaria Polonica
• Rocznik: 1982
• Tom: 08
• Numer: 1-2
• Opis fizyczny: p.57-67,fig.,ref.

Twórcy

autor

Giec A.

• Institute of Human Nutrition, Agricultural University, Mazowiecka 48, 60-623 Poznan, Poland

Bibliografia

• 1. Biermann L., Glantz M. D.: Biochem. Bioph. Ac., 1968 167, 373.
• 2. Bouvy F. A. M.: Food Prod. Develop., 1975, March.
• 3. Dahlquist A., Asp N. G., Burval A. and Rausing M.: J. Dairy Res., 1977, 44, 541.
• 4. Dłużewski M.: Rocz. Technol. Chem. Żywn., 1969, 26, 33.
• 5. Erikson R. P., Steers E.: J. Bacterial., 1970, 102, (1). 79.
• 6. Giec A., Kosikowski F. V.: Acta Microb. Pol. (in press).
• 7. Holsinger V. H.: Food Technol., 1978, March, 35.
• 8. Lowry O. H., Rosenbrough N. J., Farra A. E., Randall R. J.: J. Biol. Chem., 1951, 193, 265.
• 9. Mahoney R. R ., Nickerson T. A., Whitaker J. R.: J. Dairy Sci., 1975, 58, (11), 1620.
• 10. Mahoney R. R., Whitaker J. R.: J. Food Sci., 1978, 43, 584.
• 11. Marffy F., Kula M. R.: Biotechnol. Bioeng., 1974, 26, 623.
• 12. Mauser H. R.: Disc Electrophoresis and Related Techniques of Polyacrylamide Gel Electroohoresis. Ed. Walter de Gruyter. Berlin-New York 1971.
• 13. Nomoto N., Narashashi Y.: J. Biochem., 1959, 46, 653.
• 14. Okos M. R., Grulke E. A., Syverson A.: J. Food Sci., 1978, 43, 566.
• 15. Rinderknecht H., Silverman P., Geokas M. G., Haverback B. J.: Clin. Chem. Ac., 1970, 28, 239.
• 16. Surażyński A., Poznański S., Chojnowski W., Mrozek Z., Rogala L.: Zesz. Nauk. AR-T Olsztyn, Technol. Żywn., 1975, (4).
• 17. Technical Bulletin-Enzyme Development Corporation Penn Plaza, New York, N. Y. 10001, 1975.
• 18. Tharon R. L., Mombois J . L. Le Lait 1976 LIV, No 551-552, 56.
• 19. Wonddowski M. V.: Proc. of Int. Biodet. Syrop. vol. 3 Univ. Rode Island Kingston. Rode Island. Sharpley J. M. and Kaplan A. M. ed. App. Pub. Ltd. Essex. England 1976.
• 20. Wendorf W. L., Amundson C. H.: J. Milk Food Technol., 1971, 34, (6), 300.
• 21. Uwijama T., Yagi H., Terada O.: Agr. Biol. Chem., 1972, 36, (4), 570.