Some substances present in fungal protein preparations as interfering factors in the determination of protein by the Lowry method

• Autorzy: Czajkowska D. , Wiacek-Zychlinska A. , Jedrychowska B. , Sawicka-Zukowska R.

Warianty tytułu

PL

Wpływ wybranych substancji występujących w grzybowych preparatach białkowych na wyniki oznaczeń zawartości białka metodą Lowry'ego

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Study was made of the interference with the protein determination using the Lowry procedure, caused by starch, pectin, carboxymethylcellulose and of their enzymie degradation products as well as of other substances contained in the media used for the production of fungal protein preparations. The interfering effect of these substances was investigated prior to and after their pretreatment with 1 M NaOH at 100°C for 10 min. It was found that the investigated substances affect the protein results in a different measure, and that their pretreatment enhances and sometimes reverses the interfering action.

PL

Prześledzono wpływ skrobi, pektyny, celulozy i produktów ich rozkładu enzymatycznego oraz innych związków chemicznych używanych jako składniki podłóż i występujących w grzybowych preparatach białkowych, na wyniki oznaczeń zawartości białka metodą Lowry'ego, zaproponowaną przez Raimbaulta i Alazarda (18) Wpływ wyżej wymienionych substancji określano bez i po wstępnym traktowaniu roztworem 1 M NaOH w temp. 100°C przez 10 min. Stwierdzono, że skrobia i dekstryny (rys. 2), karboksymetyloceluloza i sacharoza (rys. 4) oraz mocznik (rys. 3), nie traktowane wstępnie gorącym roztworem NaOH, w stężeniach do 1% nie wpływają na wyniki oznaczeń zawartości białka metodą Lowry'ego. Większość spośród przebadanych soli mineralnych, w stężeniach powyżej 1%, zaniża w różnym stopniu odczyty ilości białka badaną metodą (rys. 5). Glukoza, galaktoza i maltoza w stężeniach powyżej 0,1% (rys. 4) oraz pektyna i produkty jej enzymatycznego rozkładu w stężeniach wyższych niż odpowiednio 0,45 i 0,3%, nie traktowane wstępnie gorącym roztworem 1 M NaOH, (rys. 3) zawyżają odczyty absorbancji. Wstępne traktowanie roztworem NaOH w temp. 100°C przez 10 min wyżej wymienionych substancji organicznych na ogół potęguje i często zmienia ich wpływ na odczyty zawartości białka w próbce. Na przykład glukoza, galaktoza i maltoza, poddane wstępnemu ogrzewaniu w roztworze NaOH, zawyżają odczyty absorbancji począwszy już od stężenia 0,02% (rys. 4), natomiast mocznik począwszy od tego samego stężenia (0,02%) wyraźnie zaniża wyniki oznaczeń zawartości białka (rys. 3). W związku z dużym rozcieńczaniem próbek przed wykonaniem oznaczenia (od 1000 do 2000 razy) a tym samym znacznym zmniejszaniem się stężenia substancji towarzyszących, mogących wpływać na wyniki analizy, metoda Lowry'ego zaproponowana przez Raimbault a i Alazard a (18) jest przydatna i pozwala uzyskiwać porównywalne wyniki zawartości białka dla większości grzybowych preparatów białkowych. W niektórych jednak przypadkach, na przykład przy stosowaniu podłóż zawierających znaczne ilości słomy i/lub wytłoków jabłkowych oraz wysłoków buraczanych obserwuje się wyraźne zawyżenie wyników oznaczeń białka, co wskazuje na konieczność zmodyfikowania metody (np. uwzględnianie odpowiednich poprawek).

• Wydawca: -
• Czasopismo: Acta Alimentaria Polonica
• Rocznik: 1986
• Tom: 12
• Numer: 2
• Opis fizyczny: p.135-142,fig.,ref.

Twórcy

autor

Czajkowska D.

• Institute of the Fermentation Industry, Rakowiecka 36, 02-532 Warsaw, Poland

autor

Wiacek-Zychlinska A.

• Institute of the Fermentation Industry, Rakowiecka 36, 02-532 Warsaw, Poland

autor

Jedrychowska B.

• Institute of the Fermentation Industry, Rakowiecka 36, 02-532 Warsaw, Poland

autor

Sawicka-Zukowska R.

• Institute of the Fermentation Industry, Rakowiecka 36, 02-532 Warsaw, Poland

Bibliografia

• 1. Bejer E. M.: Lab. Delo 1976 (10), 590.
• 2. Bensadoun A., Weinstein D.: Anal. Biochem., 1976, 70, 241.
• 3. Berg D. H.: Anal. Biochem., 1971, 42, 505.
• 4. Blümel P., Uecker W.: Anal. Biochem., 1976, 76, 524.
• 5. Bonitati J., Elliot W. E., Miles P. G.: Anal. Biochem., 1969, 31, 399.
• 6. Chou S. C., Goldstein A.: Biochem. J., 1960, 75, 109.
• 7. Cookson C.: Anal. Biochem., 1978, 88, 340.
• 8. Eichberg J., Mokrash L. C.: Anal. Biochem., 1969, 30, 386.
• 9. Final recommendation on the measurement of cellulase activities Commision on Biotechnology IUPAC 1983.
• 10. Gaal D., Holezinger L.: Acta Biochim. Biophys. Acad. Sc. Hung., 1975, 10, (3), 201.
• 11. Gerhardt B., Breevers H.: Anal. Biochem., 1968, 24, 337.
• 12. Higuchi M., Yoshida F.: Anal. Biochem., 1977, 77, 542.
• 13. Higuchi M., Yoshida F.: Agric. Biol. Chem., 1978, 42 (9), 1669.
• 14. Ji T. H.: Anal. Biochem., 1973, 52, 517.
• 15. Letoy K., Jesudian Ch. R.: Anal. Biochem., 1975, 69, 632.
• 16. Lowry O. H., Rosenbrough N. J. Farr A. L. Randall R. J .: J . Biol. Chem., 1951, 193, 265.
• 17. Peterson G. L.: Anal. Biochem., 1979, 100, 201.
• 18. Raimbault M., Alazard D.: Eur J . Appl. Microbiol. Biotechnol., 1980, 9 (3), 199.
• 19. Rej R., Richards A. H.: Anal. Biochem., 1974, 62, 240.
• 20. Shepard G. R., Hopkins P. A.: Anal. Biochem., 1963, 35, 1548.
• 21. Stauffer C. L.: Anal. Biochem., 1975, 69, 646.
• 22. Worowski K., Ostrowska H.: Wiad. Chem., 1982, 36, 29.