Biologiczna aktywność lipopolisacharydów klinicznych szczepów Bacteroides fragilis wyizolowanych w Polsce określona w reakcji z lizatem amebocytów Limulus (LAL)

• Autorzy: Rokosz A. , Gorska P. , Michalkiewicz J. , Luczak M.

Warianty tytułu

EN

Biological activity of lipopolysaccharides from clinical Bacteroides fragilis strains isolated in Poland determined in reaction with Limulus amoebocyte lysate (LAL)

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Badaniami objęto lipopolisacharydy wyekstrahowane z dziewięciu klinicznych szczepów B. fragilis wyizolowanych w Polsce. Biologiczną aktywność preparatów LPS oznaczono przy użyciu fotometrycznego testu BET (poprzednio LAL). Aktywność lipopolisacharydów klinicznych szczepów B. fragilis porównano z aktywnością LPS referencyjnych szczepów B. fragilis i LPS E. coli 055:B5. Wśród lipopolisacharydów pałeczek gatunku B. fragilis największą aktywność w reakcji z odczynnikiem LAL wykazał LPS szczepu wyizolowanego z ropnia trzustki.

EN

The aim of this study was to determine a biological activity of lipopolysaccharides (LPS) from clinical Bacteroides fragilis strains isolated in Poland by means of quantitative, photometric BET (LAL) method with Limulus polyphemus amoebocyte lysate and chromogenie substrate S-2423. Lipopolysaccharides were extracted from nine clinical B. fragilis strains by the procedure of Westphal and J arm (1965). Crude LPS preparations were purified with ultracentrifugation. Biological activities of bacterial endotoxins were determined by quantitative BET method with chromogenie substrate S-2423 (ENDOCHROME™ kit). Tests were performed according to the recommendations of the producer (Charles River Endosafe® Ltd., USA). E. coli 055:B5 LPS and LPS preparations from reference B. fragilis strains were applied to compare the results of examinations. Activities of endotoxins from clinical B. fragilis strains isolated in Poland determined in reaction with Limulus amoebocyte lysate were differentiated. Among endotoxins of clinical B. fragilis strains the most active was the preparation from strain cultured in the case of pancreatic ulcer (B. fragilis 80/81 LPS). Lipopolysaccharides of examined B. fragilis strains were less active in BET test than E. coli 055:B5 LPS.

Słowa kluczowe

PL

lipopolisacharydy; aktywnosc biologiczna; Bacteroides fragilis; szczepy enterotoksyczne; test LAL; bakterie Gram-ujemne; endotoksyny; choroby jelit; kwasy tluszczowe krotkolancuchowe; enzymy; bialka blony zewnetrznej; Limulus polyphemus

• Wydawca: -
• Czasopismo: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia
• Rocznik: 2003
• Tom: 55
• Numer: 4
• Opis fizyczny: s.365-370,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Rokosz A.

• Katedra i Zakład Mikrobiologii Lekarskiej, Akademia Medyczna, ul.T.Chałubińskiego 5, 02-004 Warszawa

autor

Gorska P.

autor

Michalkiewicz J.

autor

Luczak M.

Bibliografia

• 1. Finegold SM. Anaerobic infections in humans: an overview. Anaerobe 1995; 1:3-9.
• 2. Hofstad T. Immunochemical studies of lipopolysaccharide and partially degraded lipopolysaccharide from Bacteroides fragilis IPL E 323. Acta Pathol Microbiol Scand В 1982; 90: 281-7.
• 3. Hofstad T. Pathogenicity of anaerobic gram-negative rods: possible mechanisms. Rev Infect Dis 1984; 6: 189-99.
• 4. Hofstad T. Virulence factors in anaerobic bacteria. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1992; 11: 1044-8.
• 5. Hofstad T, Skaug N, Sveen K. Stimulation of В lymphocytes by lipopolysaccharides from anaerobic bacteria. Clin Infect Dis 1993; 16(Suppl 4):200-202.
• 6. Hoist O, Ulmer AJ, Brade H i inni. Biochemistry and cell biology of bacterial endotoxins. FEMS Immunol Med Microbiol 1996; 16: 83-104.
• 7. Kasper DL. Chemical and biological characterization of the lipopolysaccharide of Bacteroides fragilis subspecies fragilis. J Infect Dis 1976; 134: 59-66.
• 8. Kasper DL, Weintraub A, Lindberg AА i inni. Capsular polysaccharides and lipopolysac­charides from two Bacteroides fragilis reference strains. J Bacteriol 1982; 153: 991-7.
• 9. Meisel-Mikotajczyk F, Rokosz A, Grzelak-Puczyńska I. Serological activity of Bacteroides fragilis culture supernatants. J Appl Bacteriol 1981; 51: 393-8.
• 10. Meisel-Mikołajczyk F, Rokosz A, Grzelak-Puczyńska I. Serological activity of Bacteroides fragilis endotoxins - strains isolated in Poland. J Appl Bacteriol 1981; 51: 399-404.
• 11. Meisel-Mikołajczyk F, Rokosz A, Kaca W. The cell-surface antigens of Bacteroides thetaiotaomicron. Eur J Epidemiol 1989; 5: 486-96.
• 12. Onderdonk AB, Kasper DL, Cisneros RL i inni. The capsular polysaccharide of Bacteroides fragilis as a virulence factor: comparison of the pathogenic potential of encapsulated and unencapsulated strains. J Infect Dis 1977; 136:82-9.
• 13. Poxton IR, Edmond DM. Biological activity of Bacteroides lipopolysaccharide: re-appraisal. Clin Infect Dis 1995; 20(Suppl 2): 149-53.
• 14. Rokosz A. Grupa Bacteroides fragilis i jej znaczenie w medycynie. Post Mikrobiol 1991; 30: 57-77.
• 15. Rokosz A. Immunochemiczne właściwości antygenów powierzchniowych Bacteroides thetaiotaomicron. Praca doktorska, Akademia Medyczna w Warszawie, 1988.
• 16. Rokosz A. Stymulacja ekspresji cząsteczek adhezyjnych śródbłonka naczyniowego - nowa aktywność toksyn Bacteroides fragilis i Bacteroides thetaiotaomicron. Praca habilitacyjna, Akademia Medyczna w Warszawie, 2002.
• 17. Rokosz A, Aleksandrowicz J, Fiejka M i inni. Próba zastosowania testu BET (LAL) do oznaczenia biologicznej aktywności lipopolisacharydów i wielocukrów otoczkowych Bacteroides fragilis i Bacteroides thetaiotaomicron. Med Dośw Mikrobiol 2001; 53: 387-94.
• 18. Rokosz A, Fiejka M, Górska P i inni. Zastosowanie reakcji z lizatem amebocytów Limulus (LAL) do oznaczania biologicznej aktywności lipopolisacharydów referencyjnych i klinicznych szczepów z grupy Bacteroides fragilis. Med Dośw Mikrobiol 2002; 54: 365-9.
• 19. Rokosz A, Marciniak-Rusek A, Aleksandrowicz J i inni. Zastosowanie testu LAL do ilościowego oznaczania endotoksyny Bacteroides fragilis. Med Dośw Mikrobiol 1997; 49: 161-8.
• 20. Rokosz A, Meisel-Mikołajczyk F, Kot K i inni. Analiza kwasów tłuszczowych występujących w lipopolisacharydach Bacteroides thetaiotaomicron i Bacteroides fragilis. Med Dośw Mikrobiol 2001; 53: 177-83.
• 21. Summanen P, Baron EJ, Citron DM i inni. Wadsworth Anaerobic Bacteriology Manual. Star Publishing Company, Belmont, CA, 1993.
• 22. Weintraub A, Zähringer U, Wollenweber H-W i inni. Structural characterization of the lipid A component of Bacteroides fragilis strain NCTC 9343 lipopolysaccharide. Eur J Biochem 1989; 183: 425-31.
• 23. Westphal O, Jann K. Bacterial lipopolysaccharides: extraction with phenol-water and further applications of the procedure. Methods Carbohydr Chem 1965; 5: 83-91.
• 24. Wollenweber H-W, Rietschel ET, Hofstad T i inni. Nature, type of linkage, quantity, and absolute configuration of (3-hydroxy) fatty acids in lipopolysaccharides from Bacteroides fragilis NCTC 9343 and related strains. J Bacteriol 1980; 144: 898-903.
• 25. Wollenweber H-W, Seydel U, Lindner В i inni. Nature and location of amide-bound (R)-3-acyloxyacyl groups in lipid A of lipopolysaccharides from various gram-negative bacteria. Eur J Biochem 1984; 145: 265-72.