Preferencje help
Widoczny [Schowaj] Abstrakt
Liczba wyników

Znaleziono wyników: 29

Liczba wyników na stronie
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników

Wyniki wyszukiwania

help Sortuj według:

help Ogranicz wyniki do:
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
Bakterie reprezentujące rodzaj Bacillus stosowane są do produkcji wielu komercyjnych biopreparatów. Mikroorganizmy te charakteryzują się dużą szybkością wzrostu, a także wydajnym systemem syntezy i sekrecji białek. Szczególne znaczenie mają syntetyzowane przez nie α-amylazy, które posiadają szerokie spektrum zastosowań począwszy od przemysłu spożywczego, będącego głównym odbiorcą enzymu, skończywszy na przemyśle farmaceutycznym. W związku z różnorodnością potrzeb poszczególnych gałęzi przemysłu istnieje konieczność produkcji preparatów amylolitycznych charakteryzujących się zróżnicowanymi optymalnymi parametrami kinetycznymi, szczególnie w odniesieniu do pH oraz temperatury. Celem badań była izolacja środowiskowych szczepów bakterii należących do rodzaju Bacillus wykazujących aktywność amylolityczną oraz określenie wpływu czynników środowiskowych na katalityczne działanie syntetyzowanych przez nie enzymów. Analizowano pięć białek produkowanych przez trzy szczepy B. subtilis oraz przez jeden szczep B. pumilus i B. licheniformis. Przeprowadzone badania wykazały, iż wszystkie α-amylazy zachowywały aktywność w pH 3,6–10,0 i w szerokim przedziale temperatur 25–100oC. Aktywność poszczególnych enzymów podano w postaci ich aktywności właściwej. Ustalono, iż największą aktywność amylolityczną wykazywało białko syntetyzowane przez szczep B. pumilus P2 (188 U·mg-1), najmniejszą aktywnością charakteryzował się natomiast enzym produkowany przez B. subtilis S10 (77 U·mg-1).
Two PCR-based methods for identification of emetic toxin producing Bacillus cereus strains were developed. The first set of primers cesBF and cesBR allowed for the amplification of cesBI 838 bp long fragment of cereulide biosynthesis operon for cereulide producing strains, or 421 bp long fragment of nonribosomal peptide synthetase (nrps) for emetic toxin non producing strains. Detection of both genes cesBI and nrps was possible in one PCR reaction. Among 24 strains of Cereus group tested, only one named 19W-cesB contained cesBI gene fragment. Bacillus cereus isolate 19W-cesB did not contain of any other genes of nonribosomal peptide synthetases responsible for the synthesis of other low molecular weight peptide toxins. The shdR and shdF second primer set allowed for specific amplification of the other 690 bp long fragment of cesBII gene. Only strain 19W-cesB allowed for the PCR synthesis of appropriate amplicon from all tested strains. Proposed methods may be fast and reliable techniques for detection of Bacillus cereus strains producing cereulide.
W artykule omówiono wykorzystanie różnych metod PCR do wykrywania patogenów w próbkach żywności, ze szczególnym uwzględnieniem automatycznego systemu BaxQ7®. Omówiono podstawy działania tego systemu oraz metody wykorzystywane do detekcji produktów PCR i weryfikacji ich specyficzności. System BaxQ7® pozwala na analizę obecności Salmonella sp., E. coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Listeria sp., Enterobacter sakazaki, Campylobacter coli/jejuni/lari, Staphylococcus aureus oraz drożdży i pleśni w różnych produktach spożywczych, znacznie skraca czas ich badania.
Taxonomic differentiation between Lactococcus sp. and Leuconostoc sp. can sometimes be misleading due to the morphological and biochemical similarities between both genera. Therefore, several molecular techniques have been applied to identify these bacteria. Restriction fragment length polymorphism analysis of PCR-amplified 16S ribosomal RNA gene was used to generate restriction profiles of 9 strains of Lactococcus sp. and 5 of Leuconostoc sp. This method utilizes a set of universal primers for amplification of the 16S rRNA region of typical lactic acid bacteria species. The size of the amplified products was about 1500 bp and the amplicons of the different species could be differentiated from each other with four restriction endonucleases: TaqI, EcoRI, BamHI and HindIII. These restriction enzymes were selected based on nucleotide sequences of 16S rRNA genes for LAB available in databases. Our study demonstrates that DNA of 16S rRNA from strains of Lactococcus sp. contains single restriction site for EcoRI and two restriction sites for TaqI enzymes, 16S rRNA DNA from strains of Leuconostoc sp. contains a single restriction site for each enzyme (HindIII, BamHI) and four restriction sites for TaqI. This result is in good agreement with analysis in silico of 16S rRNA genes published in the National Center for Biotechnology Information (NCBI). These findings led to modify the classification obtained by biochemical methods for five examined strains of lactic acid bacteria. In summary, our study demonstrated that the RFLP analysis applied is a useful method for rapid differentiation between Lactococcus sp. and Leuconostoc sp.
PCR-RFLP analysis of commonly occurring insertion sequences ISS1-type, IS904 and IS982 in Lactococcus sp. and Leuconostoc sp. was used for the genetic differentiation of 17 strains of lactic acid bacteria. ISS1-type and IS982 were found in all analysed strains while 1S904 was present exclusively in strains belonging to Lactococcus sp. Amplification of ISS1-type IS sequences resulted in formation of about 820 bp long amplicons, except of strains Lactococcus lactis ssp. lactis E and Leuconostoc lactis R where extra DNA bands about 370 bp long were observed. Similarly for strains of Leuconostoc lactis M and N, additional DNA bands about 280 bp long were present. TaqI digestion of ISS1-type amplicons revealed that all analysed sequences belonged to the restriction type (ii) or (iii) for which major restriction products were 543 and 147 bp long. Amplification of IS904 from all strains of Lactococcus sp. generated amplicons about 1260 bp long. In three strains of Leuconostoc sp. M, N and R, shorter amplicons about 880 bp were observed whereas strains O and P did not contained IS904. Amplification of IS982 resulted in formation of amplicons about 1000 bp long and no extra bands were observed for all tested strains. TaqI digestion of amplification products showed that for strains C, I and F, G, H, belonging to Lactococcus sp. smaller DNA bands were visible suggesting that they contain two different types of IS9S2.
Pierwsza strona wyników Pięć stron wyników wstecz Poprzednia strona wyników Strona / 2 Następna strona wyników Pięć stron wyników wprzód Ostatnia strona wyników
JavaScript jest wyłączony w Twojej przeglądarce internetowej. Włącz go, a następnie odśwież stronę, aby móc w pełni z niej korzystać.