Poszukiwanie optymalnej metody wyodrębniania alergenów sojowych z produktów mięsnych

• Autorzy: Gorecka P. , Piasecka-Kwiatkowska D. , Frala A.

Warianty tytułu

EN

Research of optimum soy allergen extraction method from meat products

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

W trakcie produkcji wyrobów mięsnych stosowane są różne dodatki technologiczne, w tym białka roślinne, które mogą stanowić potencjalne źródło ukrytych alergenów w gotowych wyrobach. Dlatego też niezbędna jest skuteczna kontrola produktów, tak aby w konsekwencji zapewnić bezpieczeństwo konsumentom ze zdiagnozowaną alergią pokarmową. Celem prezentowanych badań było wskazanie efektywnego sposobu ekstrakcji alergennych białek sojowych z farszu parówkowego, przed obróbką techniczną i po niej. Oceny dokonano na podstawie oznaczenia zawartości tych białek z wykorzystaniem enzymatycznego testu fazy stałej ELISA. Z badanych farszów białka izolowano 18 metodami (dla każdego z 6 rozpuszczalników zastosowano 3 sposoby izolacji). Wykazano, że na ekstraktywność białek sojowych z badanego materiału statystycznie istotny wpływ miał zarówno rodzaj stosowanego rozpuszczalnika, jak i sposób izolacji. Spośród użytych w badaniach rozpuszczalników najlepszym okazał się 120 mM Tris-HCl o pH 8,6 z dodatkiem 0,05% Tween 20.

EN

During the meat production products various technological additives are used, including vegetable protein. Soy proteins have good water-binding properties and emulsifying fat. They also improve the quality and performance of the final product and increase the total protein content in these products, through the interaction of muscle protein. Soy proteins can be a potential source of hidden allergens in meat products. Therefore, it is necessary to create an effective tool to control these products to ensure the safety of people with food allergy. The aim of this study was evaluation of the best extraction method of allergenic soy proteins from stuffing before and after heat treatment by determining the content of these proteins by ELISA method. Allergens from the stuffing were isolated by 18 methods. Six solvent were used: 10 mM PBS, pH 7.4; 10 mM PBS, pH 7.4 containing 0.05% Tween 20; 120 mM Tris-HCl, pH 7.4 containing 0.1% BSA, 0.05% Tween 20, 2% SDS, 2% 2-mercaptoethanol; 120 mM Tris-HCl, pH 8.6 containing 0.1% BSA, 0.05% Tween 20, 2% SDS, 2% 2-mercaptoethanol; 120 mM Tris-HCl, pH 8.6 and 120 mM Tris-HCl, pH 8.6 containing 0.05% Tween 20. For each solvent, three isolation methods were used: shaking at 25°C, shaking at 37°C in a water bath and sonication at 37°C. Rabbit anti-soy protein antibody (SIGMA S2519) at 1 : 3000 dilution and goat anti-rabbit IgG conjugated with peroxidase (SIGMA A8275) at 1 : 8000 dilution were used for soy quantification in analyzed stuffings. The extract obtained from 1 g minced soybeans with 10 ml 10 mM PBS pH 7.4 at 25°C was used as a standard and soy protein content of the analyzed extracts was expressed in ppm soybean. Western blot was performed to verify immunoreactivity of antibodies and to eliminate cross-reactivity between antibodies and matrix. The types of solvent, as well as isolations method were statistically significant influenced onallergenic soy protein contentin extracts. For extracts from stuffing before heat treatment the most effective extraction method was 120 mM Tris-HCl, pH 8.6 containing 0.05% Tween 20. It was observed that the temperature of extraction has not an effect on soy protein contents extracted. The addition of Tween 20 to a solvent supported soy protein extraction from stuffing after heat treatment. Among the solvents used in this study 120 mM Tris-HCl, pH 8.6 containing 0.05% Tween 20 was the best. The use of sonication hindered the soy protein isolation.

• Wydawca: -
• Czasopismo: Zeszyty Problemowe Postępów Nauk Rolniczych
• Rocznik: 2014
• Tom: 579
• Opis fizyczny: s.9-15,rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Gorecka P.

• Katedra Biochemii i Analizy Żywności, Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, ul.Mazowiecka 48, 60-623 Poznań

autor

Piasecka-Kwiatkowska D.

• Katedra Biochemii i Analizy Żywności, Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, ul.Mazowiecka 48, 60-623 Poznań

autor

Frala A.

• Katedra Biochemii i Analizy Żywności, Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu, ul.Mazowiecka 48, 60-623 Poznań

Bibliografia

• Cucu T., Devreese B., Kerkaert B., Rogge M., Vercruysse L., De Meulenaer B., 2012. ELISA-Based Detection of Soybean Proteins: A Comperative Study Usin Antibodies Againts Modified and Native Proteins. Food Anal. Methods 5, 1121–1130.
• Dłużewski M., Dłużewska A., 2001. Technologia żywności: podręcznik dla technikum, część 2 (red. M. Dłużewski, A. Dłużewska). Wydawnictwo Szkolne i Pedagogiczne, Warszawa.
• Kou D., Mitra S., 2003. Sample preparation Techniques in analytical chemistry. Red. S. Mitra. Wiley & Sons, New Jersey, 139–182.
• Lienqueo M.E., Mahn A., Vesquez L., Asenjo J.A., 2003. Methodology for predicting the separation of proteins by hydrophobic interaction chromatography and its application to a cel extract. J. Chrom. A. 1009, 189–196.
• Lonthe S.V., Joshi M.S., Bhosale A.A., Kale S.B., 2011. Isolation of Quality Soy Protein form Soya flakes. Int. J. Res. Pharmac. Biomedic. Sci. 2, 1175–1177.
• L’Hocine L., Boye J.I., 2007. Allergenicity of soybean: New development in identification of allergenic proteins, cross-reactivities and hypoallergenization Technologies. Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 47(2), 127–143.
• Morishita N., Kamiya K., Matsumoto T., Sakai S., Teshima R., Urisu R., Moriyama T., Ogawa T., Akiyama H., Morimatsu F., 2008. Reliable Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for determination of Soybean Proteins in Processed Foods. J. Agric. Food Chem. 56, 6818–6824.
• Platteau C., Cucu T., De Meulenaer B., Devreese B., De Loose M., Taverniers I., 2011. Effect of protein glycation in the presence or absence of wheat proteins on detection of soybean proteins by commercial ELISA. Food Addit. Contam. 28(2), 127–135.
• Renčová E., Tremlová B., 2009. ELISA for Detection of Soya Proteins in Meat Products. Acta Vet. Brno 78, 667–671.
• Steinhoff M., Fischer M., Paschke-Kratzin A., 2011. Comparison of extraction conditions for milk and hen’s egg allergens. Food Additives and Contaminants 28(4), 337–383.
• Stepnowski P., Synak E., Szafranek B., Kaczyński Z., 2010. Techniki separacyjne (red. P. Stepnowski, E. Synak, B. Szafranek, Z. Kaczyński). Wydawnictwo Uniwersytetu Gdańskiego, Gdańsk, 30–120.
• Warchalewski J.R., Piasecka-Kwiatkowska D., Kuśnierz R., Wyatt G.M., Daussant J., 1998. Zastosowanie immunoanalizy w przemyśle spożywczym. Przemysł Spożywczy 12, 21–24, 59.
• Wilson S., Blaschek K., de Mejia E.G., 2005. Allergenic proteins in soybean: processing and reduction of P34 allergenicity. Nutr. Rev. 63(2), 47–58.