Modyfikacja fluorometrycznego oznaczania witaminy A w surowicy

• Autorzy: Heydrych E.M.

Warianty tytułu

EN

Fluorometric determination of vitamin A in the serum

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

RU

Применялся флюорометрический метод количественного определения витамина А в сыворотке скота без предварительной хроматографической очистки экстракта сыворотки от интерферирующих воществ. Наиболее важной причиной количественных ошибок в определении витамина А являются каротинойды как бесцветные как фитофлюэн, так и цветные. В предлагаемом методе использовано известные из литературы флюоресцентные свойства витамина А для определений его действительной концентрации, свободной от упомянутых ошибок. Разрабатывая метод, обращено также внимание на ретинол, используемый как эталон витамина А, и на фитофлюэн как эталон бесцветных каротиноидов. Последний изолировался в собственном объеме из томатов. После экстракции витамина А из сыворотки в гексан определялись поочередно абсорбция каротинов при длине волны 455 пм и флюоресценция витамина А при длине волны 478 пм с использованием возбуждений, характерных для витамина А: 330 пм и фитофлюэна: 365 пм. На основе полученных результатов подсчитывались флюоресценция витамина А при 330 пм возбуждения (F₃₃₀) и ее понижение (FK), вызванное каротинами. Собственно флюоресценцию (Fc), свободную от влияния каротиноидов, подсчитывалось, суммируя воличины F₃₃₀ и FK. Зная величины Fc, можно было подсчитать концентрацию ретинола в экстракте, опираясь на величины параметров прямой регрессии ретинола.

EN

A fluorometric method for quantitative determination of vitamin A in bovine sera, without their previous chromatographic purification from interfering substances, has been applied. Carotenoids are the main cause of quantitative errors in the determination of vitamin A both colourless like phytofluene and coloured carotens. Fluorescent properties of vitamin A were employed in the proposed method. Retinol and phytofluene were used as standards of vitamin A or colourless carotenoids respectively. Phytofluene was isolated from tomatoes. Following vitamin A extraction from the serum and conversion into hexane carotenoid absorption at the wavelength of 455 nm and vitamin A fluorescence at the wavelength of 478 were determined using excitation characteristic for vitamin A — 330 nm and for phytofluene — 365 nm. On the basis of the results the degree of vit. A fluorescence and its decline caused by carotenes was calculated. The true fluorescence (Fw), free from carotenoids influence, was calculated by summing up the values F330 and Fk. The concentration of retinol in the extract was determined from Fw on the basis of parameters of retinol regression line.

• Wydawca: -
• Czasopismo: Medycyna Weterynaryjna
• Rocznik: 1988
• Tom: 44
• Numer: 01
• Opis fizyczny: s.50-54,rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Heydrych E.M.

• Zakład Ekologii Produkcji Zwierzęcej, Instytut Weterynarii, ul.Grunwaldzka 250, 60-166 Poznań

Bibliografia

• 1. Anon.: Eur. J. Biochem. 129, 1, 1982.
• 2. Anon.: Mongr. Biochem. 29, 123, 1974.
• 3. Bouda J., Jagos P., Dvořák V.: Česk. Fysiol. 29, 321, 1980.
• 4. Broich C. R., Gerber L. E., Erdman J. W.: Lipids 18, 253, 1983.
• 5. Brubacher G., Vuilleumier J. P.: Information Service. Animal Nutrition Department. F. Hoffman — La Roche and Co. Ltd., CH — 4002 Basle (Switzerland), 1980.
• 6. Chow. F. J., Omage S. T.: Lipids 18, 837, 1983.
• 7. Drujan B. D.: Methods Enzymol. Vitamins and Coenzymes, C, 18, 565, 1971.
• 8. Drujan B. D., Castillon R., Guerrero E.: Anal. Biochem. 23, 44, 1968.
• 9. Dvořák M., Herzig L, Vojtišek В., Toulavá: Vet. Med. (Prague). 23, 577, 1978.
• 10. Embree N. D., Ames S. R., Lehman R. W., Harris P. L.: Methods Biochem. Anal. 4, 43, 1967.
• 11. Erdman J. W., Hou S.-H. F., Lachance P. A.: J. Food Sci. 38, 445, 1973.
• 12. Garry P. J., Pollack J. D., Owen G. M.: Clin. Chem. 16, 766, 1970.
• 13. Glover J. P., Moxley L., Muhilal H., Weston S.: Clin. Chim. Acta 50, 371, 1974.
• 14. Gouth J., Vasil M.: Veterinarstvi 2, 77, 1974.
• 15. Hansen L. G., Waewick W. J.: Am. J. Clin. Pathol. 50, 529, 1968.
• 16. Kahan J.: Methods Enzymol. Vitamins and Coenzymes, C, 18, 574, 1971.
• 17. Senyck G. F., Gregory J. F., Shide W. F.: J. Dairy Sci. 58, 558, 1975.
• 18. Thompson J. N.: Eur. J. Cancer Clin. Oncol. 19, 1645, 1983.
• 19. Thompson J. N., Erdody P., Brien R., Murray T. K.: Biochem. Med. 5, 67, 1971.
• 20. Thompson J. N., Erdody P., Maxwell W. B.: Biochem. Med. 8, 403, 1973.
• 21. Thompson J. N., Erdody P., Maxwell W. B., Murray T. K.: J. Dairy Sci. 55, 1077, 1972.
• 22. Tomicki Z., Jakutowicz K., Ubysz L.: Pol. Arch. Wet. 21, 133, 1979
• 23. Toth G.: Acta Physiol. Acad. Sci. Hung. 64, 319, 1984.
• 24. Underwood В. A.: World Rev. Nutr. Diet. 19, 123, 1974.
• 25. Van Steveninck J., De Goeij A. F. P. M.: Clin. Chim. Acta. 49, 64, 1973.
• 26. Wylegalski S.: AWF, Poznań, Zakład Biochemii, 1980, dane niepubl.
• 27. Zgirski A., Gondko R.: Obliczenia biochemiczne, PWN, Warszawa 1981, s. 45.