The isolation and detection of Listeria from artificially contaminated food by use of immunomagnetic separation and cultivation procedures

• Autorzy: Wieckowska M. , Sadowska B. , Brzychcy M. , Rudnicka W. , Rozalska B.

Warianty tytułu

PL

Wykrywanie Listeria w zywnosci metoda immunomagnetycznego zageszczania

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

Food contaminated with Listeria monocytogenes is considered to be the main source of infections in humans. Listeriae are relatively tolerant to environmental factors such as low pH and high concentration of NaCl and are psychrotrophic, which gives them competitive advantage over the accompanying microflora. Rapid isolation and confirmation methods for L. monocytogenes in foods are urgently needed. The purpose of the present study was to determine the specificity and sensitivity of immunomagnetic separation technique (IMS) with para-magnetic particles targeting Listeria by anti-Listeria antibodies (DynabeadsR-Listeria). IMS was used for testing samples of raw milk, liver paste and PBS, artificially contaminated with Listeria or with a mixed population of Listeria and other species of food-borne pathogens; Enterococcus faecalis or Escherichia coli. The recovery of heat-injured Listeria by IMS was also investigated. It was shown that IMS allows detection of target bacteria with a sensitivity of 1 CFU/25 g. Using immunocapture technique, the shortening of selective Listeria enrichment time was possible despite of a rich background bacterial flora. For heat-injured Listeria, IMS allows recovery of cells repaired during pre-enrichment step, which in other isolation procedures are not able to grow or grow poorly.

PL

W pracy podjęto próbę zastosowania metody immunoseparacji (IMS) z użyciem paramagnetycznych mikroskopijnych kulek polistyrenowych związanych z przeciwciałami przeciwko Listeria (DynabeadsR anti-Listeria, Dynal AS, Oslo, Norway) do wykrywania kontaminacji prób żywności. IMS prowadzono według procedury zalecanej przez producenta. Analizie poddano próby surowego mleka, homogenatu pasztetu oraz PB S (25 mL), sztucznie zakażane czystym inokulum L. monocytogenes (100 lub 10 komórek) lub mieszanym inokulum: L. monocytogenes i L. innocua, L. monocytogenes i E. faecalis albo L. monocytogenes i E. coli. Powyższą technikę zastosowano również do wykrywania pałeczek Listeria uszkodzonych przez ogrzewanie lub zamrażanie. Zanotowano, iż IMS zwiększa możliwość wyizolowania subletalnie uszkodzonych komórek Listeria (tab. 2). Stwierdzono, że technika IMS odznacza się wysoką czułością pozwalając na wykrycie 1-10 komórek Listeria w 25 g próbki. Stosując IMS możliwe było wyizolowanie pałeczek Listeria z próbek, zawierających florę towarzyszącą (E. faecalis, E. coli) przewyższającą liczbowo bakterie docelowe (tab. 1). Immunospecyficzne „zagęszczanie" Listeria na kulkach paramagnetycznych nie jest przeszkodą w przeprowadzeniu standardowych systemów identyfikacyjnych wyizolowanych bakterii. Zastosowanie IMS pozwala na zrezygnowanie z drugiego etapu selektywnego namnażania Listeria obecnych w próbach żywności, przez co łączny czas analizy może być skrócony o 48 godzin.

Słowa kluczowe

PL

metoda immunomagnetycznego zageszczania; mikrobiologia zywnosci; metoda immunoseparacji; zywnosc; Listeria; oznaczanie

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 1999
• Tom: 08
• Numer: 1
• Opis fizyczny: s.37-43,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Wieckowska M.

• Uniwersytet Lodzki, ul.Banacha 12-16, 90-237 Lodz

autor

Sadowska B.

autor

Brzychcy M.

autor

Rudnicka W.

autor

Rozalska B.