Hydrolysis of casein using proteolytic enzymes immobilised in polyvinyl alcohol cryogel

• Autorzy: Idziak J. , Moszczynski P.

Warianty tytułu

PL

Zastosowanie immobilizowanych metoda kriozelowania enzymow proteolitycznych do hydrolizy kazeiny

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The aim of this work was to investigate the applicability of proteolytic enzymes complex (consisted of chymotrypsin, carboxypeptidase A and leucine aminopeptidase) immobilised in polyvinyl alcohol gel for hydrolysis of casein. Inversely proportional relationship between the extent of aromatic amino acids release and the concentration of casein was found. After 48 h of hydrolysis, the catalytic activities of enzymes in immobilised and native forms were equal, what is especially attractive in the case of immobilised form, bearing in mind well known advantages of biocatalysts in that form. The hydrolysis performed in column filled with immobilised enzymes resulted in as high degree of casein degradation as 80%. The high stability of obtained biocatalyst was confirmed by its 54 days half-life period.

PL

Przedmiotem pracy byla enzymatyczna hydroliza kazeiny przy zastosowaniu zestawu unieruchomionych enzymów: endopeptydazy-chymotrypsyny i egzopeptydaz: karboksypeptydazy A i aminopeptydazy leucynowej. Immobilizację przeprowadzono przez zamykanie enzymów w nośniku żelowym, którym był wodny roztwór alkoholu poliwinylowego. Stopień degradacji kazeiny oznaczono pośrednio poprzez określenie zawartości w hydrolizacie sumy aminokwasów aromatycznych. W przypadku hydrolizy prowadzonej na kolumnie wypełnionej złożem z unieruchomionymi enzymami oznaczano również stopień degradacji kazeiny na podstawie zawartości azotu aminowego. Ustalono, że optymalne rezultaty, w przypadku hydrolizy okresowej, osiągane są przy stosunku stężenia białka enzymu do stężenia białka substratu wynoszącym 1:20 0000 dla karboksypeptydazy A oraz 1:400 dla chymotrypsyny i aminopeptydazy leucynowej, po upływie 48 godzin przy pH startowym równym 8,6 oraz temperaturze 30°C. Przy tych parametrach osiągnięto bowiem 94% uwolnienia aminokwasów aromatycznych dla 0,5% roztworu kazeiny (rys. 1). W związku z tym, przy tych właśnie parametrach porównywano efektywność działania zastosowanego zestawu unieruchomionych enzymów z natywną ich formą. Stwierdzono, iż efektywność enzymów immobilizowanych jest porównywalna z efektywnością ich formy natywnej (rys. 2). Ustalono, iż w metodzie półciągłej hydrolizy kazeiny najwyższy stopień jej degradacji wynoszący 80,4% jest możliwy do osiągnięcia przy następujących parametrach: stosunek białka enzymu do stężenia białka substratu 1:40 000 dla karboksypeptydazy A i 1:800 dla chymotrypsyny i aminopeptydazy leucynowej, szybkość przepływu roztworu kazeiny przez kolumnę v=22 mL/min, pH=8,6, czas 72 godziny i temperatura 30°C.

Słowa kluczowe

PL

biochemia; kriozelowanie; hydroliza; enzymy proteolityczne; zastosowanie; kazeina

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 1999
• Tom: 08
• Numer: 2
• Opis fizyczny: s.209-215,tab.,wykr.,bibliogr.

Twórcy

autor

Idziak J.

• Politechnika Lodzka, ul.Stefanowskiego 4-10, 90-924 Lodz

autor

Moszczynski P.