Cytotoksycznosc DMSO dla komorek MRC5, Chang Liver i CV1 oznaczana in vitro metodami LK, MTT i NR

• Autorzy: Siennicka J. , Gut W. , Zuk A. , Litwinska B.
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Badano przydatność trzech różnych metod oznaczania cytotoksyczności: testu liczebności komórek (LK), mikropłytkowego testu aktywności mitochondrialnej dehydrogenazy (MTT) i kolorymetrycznego testu określającego zdolność do pochłaniania przez żywe komórki czerwieni neutralnej (NR). W pracy przedstawiono sposób walidacji tych metod. Badania przeprowadzono na różnych liniach komórkowych (MRC5, CV1 i Chang Liver) wobec DMSO jako substancji referencyjnej.

EN

Evaluation of chemicals cytotoxicity plays fundamental role in many in vitro investigations. The way of assessment of cytotoxicity depend on aim of study, characteristic of used cells and mode of action of investigated chemicals. The principal aspect of these investigations is validation of used method. In this paper validation of three different cytotoxicity assays is presented: total cell number measurement (LK), microplate assay measured mitochondrial dehydrogenase activity (MTT) and colorimetric assay measured ability of live cell to uptake neutral red (NR). The investigation was performed on different cells (MRC5, CV1 і Chang Liver) with DMSO as reference agent.

Słowa kluczowe

PL

czerwien neutralna; komorki; test aktywnosci mitochondrialnej dehydrogenazy; test liczebnosci komorek; walidacja; cytotoksycznosc; substancje chemiczne; oznaczanie; test kolorymetryczny; toksycznosc

• Wydawca: -
• Czasopismo: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia
• Rocznik: 2003
• Tom: 55
• Numer: 2
• Opis fizyczny: s.157-164,tab.,rys.,bibliogr.

Twórcy

autor

Siennicka J.

• Zaklad Wirusologii PZH, ul.Chocimska 24, 00-791 Warszawa

autor

Gut W.

autor

Zuk A.

autor

Litwinska B.

Bibliografia

• 1. Al-Rubeai M. MTT assay. W: Cell and tissue culture: labo ratory procedures. Red. A Doyle, JB Griffiths, DG Newell. Wiley, 1996, 4B:6.
• 2. Bondesson I, Ekwall B, Hellberg S i inni. MEIC-a new international multicenter project to evaluate the relevance to human toxicity of in vitro cytotoxicity tests. Cell Biol Toxicol 1989; 5: 331-47.
• 3. Borenfreund E, Babich H. Neutral Red (NR) assay. W: Cell and tissue culture: laboratory procedures. Red. A Doyle, JB Griffiths, DG Newell. Wiley, 1996, 4B:7.
• 4. Cinelli S, Falezza A, Meli C i inni. Alternative methods in toxicology tests: in vitro toxicity. Cytotechnology 1991; Suppl 1: 51-54.
• 5. Clynes M, Martin A, Dooley M. Miniaturized colorimetric methods for determining cell number. W: Cell and tissue culture: laboratory procedures. Red. A Doyle, JB Griffiths, DG Newell. Wiley, 1996, 4B:5.
• 6. Evaluation, validation and implementation of new microbiological testing methods. Technical Report no. 33. PDA J Pharm Science Technol 2000; 54: 2-39.
• 7. Forsby A. In vitro toxicity: mechanisms, alternatives and validation - a report the 19th annual scientific meeting of the Scandinavian Society for Cell Toxicology. Altern Lab Anim 2002; 30: 307-308.
• 8. Goldberg AM, Frazier JM, Brusick D i inni. Framework for validation and implementation of in vitro toxicity tests. In Vitro Cell Dev Biol Anim 1993; 29A:688-92.
• 9. Grie P, Koronkiewicz M, Skierski JS. Cytostatic and cytotoxic effects of (E)-2'-(fluoromethylene)-cytydine on solid tumor and a leukemia cell line. Acta Biochim Pol 2000; 47: 165-71.
• 10. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays. J Immunol Methods 1983; 65: 55-63.
• 11. Putnam KP, Bombick DW, Doolittle DJ. Evaluation of eight in vitro assays for assessing the cytotoxicity of cigarette smoke condensate. Toxicol In Vitro 2002; 16: 599-607.
• 12. Riddell RJ, Pancer DS, Wilde SM i inni. The importance of exposure period and cell type in in vitro cytotoxicity tests. ATLA 1986; 14: 86-92.
• 13. Sawicki W, Kieler J, Briand P. Vital staining with neutral red and trypan blue of 3H-thymidine-labeled cells prior to autoradiography. Stain Technol 1967; 42: 143-46.
• 14. Spielmann H, Liebsch M. Validation successes: chemicals. Alter Lab Anim 2002; Suppl 2: 33-40.
• 15. Vistica DT, Skehan P, Scudiero D i inni. Tetrazolium-based assays for cellular viability: a critical examination of selected parameters affecting formazan production. Cancer Res 1991; 51: 2515-20.
• 16. West C. Colony-forming efficency. W: Cell and tissue culture: laboratory procedures. Red. A Doyle, JB Griffiths, DG Newell, Wiley, 1996, 4B:3.