Antioxidative capacity of hydrolysates of hen egg proteins

• Autorzy: Graszkiewicz A. , Zelazko M. , Trziszka T. , Polanowski A.

Warianty tytułu

PL

Aktywnosc przeciwutleniajaca w hydrolizatach jaja kurzego

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The antioxidant capacity as free radicals of 1,1 diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH) scavenger of egg white protein hydrolysate was investigated. Egg white protein precipitate obtained as a by-product in cystatin and lysozyme isolation was hydrolysed with bovine trypsin and then separated by means of RP-HPLC. Of ten fractions collected only no. 2 (0.195 μmol Trolox /mg) and no. 5 (0.186 μmol Trolox /mg) displayed a considerable free radicalscavenging capacity. The rechromatography of these fractions yielded four products of raised antioxidant activity: no. 2E (obtained from fraction no. 2) and no. 5E, 5F, 5H (obtained from fraction no. 5) which amounted to 0.482 μmol Trolox /mg and 0.584, 1.375, 1.200 μmol Trolox /mg, respectively.

PL

Celem badań było otrzymanie hydrolizatów z białek jaja kurzego będących produktem ubocznym procesu izolacji lizozymu i cystatyny oraz oznaczenie aktywności przeciwutleniającej powstałych peptydów. Frakcję białek jaja kurzego, wolną od lizozymu i cystatyny, przeanalizowano elektroforetycznie (SDS-PAGE), stwierdzając w niej obecność dominującego ilościowo białka o masie 45 kDa, odpowiadającego masie albuminy jaja, oraz śladowych ilości białka o masie 76 kDa, odpowiadającego masie konalbuminy (rys. 1). Białka te poddano hydrolizie przy użyciu trypsyny bydlęcej. Przebieg reakcji degradacji białek monitorowano poprzez oznaczenie stopnia hydrolizy (DH) oraz przyrostu wolnych grup aminowych (rys. 2, 3). Po 72 godz. hydrolizy DH osiągnął poziom 55%, natomiast stężenie wolnych grup aminowych wynosiło 79557 μmol Gly/g. Otrzymaną mieszaninę peptydów rozdzielano techniką RP-HPLC (rys. 4a). W otrzymanych frakcjach peptydów oznaczono aktywność przeciwutleniającą wyrażoną jako zdolność zmiatania wolnych rodników 1,1 difenylo-2-pikrylohydrazylu (DPPH). Spośród dziesięciu badanych frakcji dwie, oznaczone jako nr 2 i nr 5, wykazywały znacząco wysoką aktywność osiągającą wartości odpowiednio 0,195 μmol Trolox /mg i 0,186 μmol Trolox/mg (rys. 4b). Rechromatografie tych frakcje pozwoliły na ich dalsze oczyszczenie, czego efektem był wzrost poziomu badanej aktywności przeciwutleniającej (rys. 4c,e). Najwyższe poziomy tej aktywności odnotowano w subfrakcjach: 2E, 5E, 5F, 5H i wynosiły one odpowiednio: 0,482; 1,385; 1,200; 0,584 μmol Trolox /mg (rys.4d,f).

Słowa kluczowe

EN

hen egg; protein; hydrolysate; antioxidant capacity; free radical; 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl; egg white; ovalbumin

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 2007
• Tom: 57
• Numer: 4[A]
• Opis fizyczny: p.195-199,fig.,ref.

Twórcy

autor

Graszkiewicz A.

• Wroclaw University of Environmental and Life Sciences, Norwida 25/27, 50-375 Wroclaw, Poland

autor

Zelazko M.

autor

Trziszka T.

autor

Polanowski A.

Bibliografia

• 1. Davalos A., Miguel M., Bartolome B., Lopez–Fandino R., Antioxidant activity of peptides derived from egg white roteins by enzymatic hydrolysis. J. Food Protect., 2004, 67, 1939-1944.
• 2. Erlanger B.F., Kokowsky N., Cohen W., The preparation and propeties of two new chromogenic substrates of trypsin. Arch. Biochem. Biophys., 1961, 95, 271-278.
• 3. Ge S.J., Zhang L.X., Control of hydrolysis of a protein modification with immobilized protease by the pH-drop method. Acta. Biotechnol., 1993, 13, 151-160.
• 4. Gibbs B.F., Zougman A., Masse R., Mulligan C., Production and characterization of bioactive peptides from soy hydrolysate and soy–fermented food. Food Research Int., 2004, 37, 123–131.
• 5. Ismail A, Marjan, Z.M., Foong C.W., Total antioxidant activity and phenolic content in selected vegetables. Food Chem., 2004, 87, 581-586.
• 6. Kuchroo C.N., Rahilly J., Fox P.F., Assesment of proteolysis in chesse of reaction with trinitrobenzene sulphonic acid. Irish J. Food Science Technol., 1983, 7, 129-133.
• 7. Laemmli U.K., Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 1970, 227, 680-685.
• 8. Li B., Chen F., Wang X., Ji B., Wu Y., Isolation and identification of antioxidative peptides from porcine collagen hydrolysate by consecutive chromatography and electrospray ionization-mass spectrometry. Food Chem., 2007, 102, 1135-1143.
• 9. Park E.Y., Murakami H., Mori T., Matsumura Y., Effects of protein and peptide addition on lipid oxidation in powder model system. J. Agric. Food Chem., 2005, 53, 137-144.
• 10. Saiga A., Tanabe S., Nishimura T., Antioxidant activity of peptides from porcine myofibrillar proteins by protease treatment. J. Agric. Food Chem., 2003, 51, 3661-3667.
• 11. Sokołowska A., Kubiak A., Trziszka T., Polanowski A., A rapid one step separation of proteinaceous agents of antimicrobial activity from hen’s egg white. Pol. J. Food Nutr. Sci., 2007, 57, 4(C).
• 12. Miguel M., Recio I., Gomez-Ruiz J.A., Ramos M., Lopez-Fandino R., Angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity of peptides derived from egg white proteins by enzymatic hydrolysis. J. Food Protect., 2004, 67, 1914-1920.
• 13. Miguel M., Aleixandre A., Antihypertensive peptides derived from egg proteins. Am. Soc. Nutr., 2006.1457-1460.
• 14. Molyneux P., The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estinating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol., 2003, 26, 211-219.
• 15. Oszmiański J., Lanner Zarawska E., Antimutagenic and anticarcinogenic activity of plant polyphenols. Przem. Spoż., 1992, 10, 16-17 (in Polish).
• 16. Sakanaka S., Tachibana Y., Ishihara N., Juneja L.R., Antioxidant activity of egg-yolk protein hydrolysates in linoleic acid oxidation system. Food Chem., 2004, 86, 99-103.
• 17. Sakanaka S., Tachibana Y., Active oxygen scavenging activity of egg-yolk protein hydrolysates and their effects on lipid oxidation in beef and tuna homogenates. Food Chem., 2006, 95, 243-249.
• 18. Silvestre M.P.C., Review of methods for the analysis of protein hydrolysates. Food Chem., 1997, 60, 263-271.
• 19. Tsuge N., Eikawa Y., Nomura Y., Yamamoto M., Sugisawa K., Antioxidative activity of peptides prepared by enzymatic hydrolysis of egg-white albumin. J. Agric. Chem. Soc. Jpn. 1991, 65, 1635-1641.
• 20. Whitaker J.R., Granum P.E., An absolute method for protein determination based on difference in absorbance at 235 and 280. Anal. Biochem., 1980, 109, 156-159.
• 21. Wolf P., A critical re–approach of Wadell’s technique for ultraviolet spectrophotometric protein estimation. Anal. Biochem., 1983, 129, 145-155.
• 22. Yen G.C., Chen H.Y., Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagencity J. Agric. Food Chem. 1995, 43, 27-32.