Optimization of a measurement of flavonol aglycons in some medicinal plants by SPE-RP-HPLC method. Part 2. Choice of the way of sample preparation and purification

• Autorzy: Nowak R
• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The aim of this examination was optimization of flavonols' detection method in plant's extracts. The leaves of Rosa canina L. and Rosa damascena Mill, were chosen as the experi­mental material, due to their rich content of flavonols. In the study, optimization and comparison of extraction, hydrolysis and purification processes of samples predesti­nated to HPLC analysis of flavonol aglycones were performed. The most optimal method to detect flavonols in examined material was their direct hydrolysis with 1.2 N HCL dur­ing 1 h connected with its extraction with 50% methanol and then purification of the sample by SPE before HPLC examination. The comparison and evaluation of two elaborated methods of hydrolyzate purification from neutral compounds, which are liquid-liquid extraction (LLE) with ethyl acetate and solid phase extraction (SPE) in RP-18 microcolumns, were carried out. 78% recovery of standard quercetin during LLE and 98.8% recovery of standard quercetin during filtering and elution of hydrolyzate with methanol through octadecyl microcolumns in SPE method were observed. These results showed that SPE is better then LLE during superior sample purification procedure.

PL

Celem pracy byta optymalizacja metody oznaczania flawonoli w ekstraktach roślinnych. Jako materiał odniesienia wybrano liście róż Rosa canina L. i Rosa damascena Mili. jako ty­powe surowce flawonolowe. Przeprowadzono optymalizację i porównanie procesów ekstrakcji, hydrolizy i odbalastowania prób przeznaczonych do analizy HPLC aglikonów flawonolowych. Optymalną metodą detekcji flawonoli w badanych surowcach okazała się bezpośrednia hydroliza 1,2 N HCl w ciągu 1 godziny z równoczesną ekstrakcją 50% metanolem oraz odbalastowanie próby metodą SPE przed analizą HPLC. Opracowano i porównano dwie metody odbalastowania hydrolizatów, ekstrakcji typu ciecz-ciecz octanem etylu i ekstrakcji do fazy stałej na złożu oktadecylowym. Stwierdzo­no 78% (LLE) i 98,8%(SPE) odzysk wzorcowej kwercetyny w poszczególnych metodach. Wyniki wykazały wyższość i większą przydatność metody SPE niż LLE w procesie oczysz­czania prób przed analizą HPLC.

Słowa kluczowe

EN

optimization; solid phase extraction; measurement; RP-18 microcolumn; medicinal plant; purification; sample preparation; high performance liquid chromatography; flavonol aglycon

• Wydawca: -
• Czasopismo: Herba Polonica
• Rocznik: 2003
• Tom: 49
• Numer: 3-4
• Opis fizyczny: p.180-188,fig.,ref.

Twórcy

autor

Nowak R

• Medical University of Lublin, 1 Chodzki St.,20-093 Lublin, Poland

Bibliografia

• 1. STRZELECKA H.: Kryteria rejestracji leków roślinnych w świetle wymagań ustawowych . Wiad. Ziel. 1997, Nr 7-8, 25.
• 2. KOHLMÜNZER S.: Farmakognozja. PZWL, Warszawa 1997.
• 3. HARBORNE J.B.: Phytochemical methods: A guide to modern techniques of plant analysis. Cha­pman and Hall, London 1973.
• 4. RICE-EVANS C.A., MILLER N.J., PACANGA G.: Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids. Free Rad. Biol. Med. 1996, 20, 933.
• 5. ROBAK J., GRYGLEWSKI R.J.: Bioactivity of flavonoids. Pol. J. Pharm. 1996, 48, 555.
• 6. FORMIC AJ.V., REGELSON W.: Review of the biology of quercetin and related bioflavonoids. Food Chem. Toxic. 1995, 33, 1061.
• 7. HUANG Y.-T., HWANG J.-J., LEE P.-P. et al.: Effects of luteolin and quercetin, inhibitors of tyro­sine kinase, on cell growth and metastasis - associated properties in A431 cells over- expressing epidermal growth factor receptor. Br. J. Pharmacol. 1999, 128, 999.
• 8. OŻAROWSKI A.: Ziołolecznictwo. PZWL, Warszawa 1980.
• 9. CISOWSKI W.: Flawonoidy a procesy nowotworowe i mutagenne. Herba Pol. 1984, Nr 3-4, 219.
• 10. NOWAK R.: Optimization of measurement of flavonol aglycons in some medicinal plants by SPE-RP-HPLC method. Part I. Analysis of standard aglycons mixture stability. Herba Pol. 2002, 48, 67.
• 11. NOWAK R., KRZACZEK T.: Flavonoids from Rosa pomífera var. ciliato-petala Bess. (Chrshan.). Acta Pol. Pharm. 1994, 51, 407.
• 12. HERTOG M.G.L., HOLLMAN P.C.H., VENEMA D.P.: Optimization of a quantitative HPLC determi­nation of potentially anticarcinogenic flavonoids in vegetables and fruits. J. Agrie. Food Chem. 1992, 40, 1591.
• 13. HARBORNE J. B.: Plant polyphenols XVI. Characterisation of flavonoid glycosides by acidic and enzymie hydrolyses. Phytochem. 1965, 4, 107.