Ocena przydatnosci immunoenzymatycznego odczynu ELISA do wykrywania przeciwcial dla lipopolisacharydu paleczek Klebsiella rhinoscleromatis u chorych na twardziel

• Autorzy: Rastawicki W. , Kaluzewski S. , Rokosz N.

Warianty tytułu

EN

Application of enzyme linked immunosorbent assay [ELISA] for diagnosis of antibodies to lipopolysaccharide of Klebsiella rhinoscleromatis in patients with rhinoscleroma

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Odczynem ELISA poszukiwano swoistych przeciwciał dla antygenu 2a pałeczek K. rhinoscleromatis w 65 próbkach surowicy uzyskanych od osób z klinicznym podejrzeniem twardzieli. Próbki te przysłano w latach 1970-2009 do rutynowych badań odczynem wiązania dopełniacza. Obecność przeciwciał klasy IgA i IgG na poziomie diagnostycznie znamiennym wykryto w 33 (50,8%) a przeciwciał klasy IgM w 28 (43,1%) próbkach surowicy. Przeprowadzone badania wykazały wysoką czułość i swoistość odczynu ELISA z użytym antygenem w poszukiwaniu przeciwciał dla pałeczek twardzieli.

EN

The ELISA were performed on polystyrene microtiter plates (Nunc, MaxiSorp) coated with LPS (2a antigen) at the final concentration of 10 ng/ml. The antigen was extracted from Klebsiella rhino- scleromatis Rh32 by the trichloroacetic acid and separated by ethanol (Boivin method). The antibodies against the LPS were detected by ELISA in serum samples collected from 65 patients suspected in clinical investigation for rhinoscleroma in Poland from 1970 to 2009. Additionally, the specificity of the antigen was tested using serum sample of immunized rabbit and 30 sera of patients from control group, with high level of antibodies to different bacterial pathogens. All serum samples were diluted 1:100. The concentrations of IgA, IgG and IgM antibodies were expressed as optical density (OD) measured at the wavelength of 450 nm. The cut-off limit of serum antibodies was set at mean antibody OD determined in the sera of 30 blood donors exceeded by three standard deviations. The presence of IgA and IgG antibodies were detected by ELISA in 33 (50,8%) and IgM in 28 (43,1%) of patients. Most of the serum samples (75%) with high level of specific antibodies were obtained from patients before 1980. On the other hand antibodies to K. rhinoscleromatis were detected only in 2 (6,7%) patients from the control group and none of blood donors. In conclusion, our home-made ELISA, based on purified LPS of K. rhinoscleromatis showed high specificity and sensitivity in the diagnosis of antibodies to K. rhinoscleromatis in comparison to the complement fixation test. The presence of high level of specific IgA, IgG and IgM antibodies in the sera obtained in different stages of disease may showed that during the rhinoscleroma is permanent stimulation of antibody production.

Słowa kluczowe

PL

test ELISA; odczyn immunoenzymatyczny; przeciwciala; wykrywanie; antygen 2a; Klebsiella rhinoscleromatis; ludzie chorzy; twardziel [med.]; choroby zakazne; diagnostyka chorob

• Wydawca: -
• Czasopismo: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia
• Rocznik: 2010
• Tom: 62
• Numer: 1
• Opis fizyczny: s.21-28,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Rastawicki W.

• Zaklad bakteriologii, Narodowy Instytut Zdrowia Publicznego - Panstwowy Zaklad Higieny, ul.Chocimska 24, 00-791 Warszawa

autor

Kaluzewski S.

autor

Rokosz N.

Bibliografia

• 1. Andraca R, Edson RS, Kern EB. Rhinoscleroma: a growing concern in the United States? Mayo Clinic experience. Mayo Clin Proc 1993; 68:1151-7.
• 2. Dal Mk, Zaricki LA, Kołomijczenko AJ, Elbert BJ. Skieroma. Gosud Mied Izd, Kijew, 1959.
• 3. Hart Ca, Rao SK. Rhinoscleroma. J Med. Microbiol 2000; 49:395-6.
• 4. Kałużewski S. Obraz przeciwciał normalnych u ludzi dla somatycznych (grupowych) antygenów pałeczek Klebsiella. Med Dośw Mikrobiol 1969; 21: 271-84.
• 5. Kałużewski S. Niektóre cząstkowe antygeny bezotoczkowych wariantów pałeczek Klebsiella z grupy 02. Med Dośw Mikrobiol 1969; 21:25-36.
• 6. Kałużewski S. Niektóre aspekty wiarygodności metod diagnostyki bakteriologicznej i serologicznej. Roczniki WIHE 1974; 13:31-45.
• 7. Kałużewski S, Czech Z. Występowanie i zawartość antygenu Kunina (CAE) w pałeczkach Enterobacteriaceae oraz innych bakteriach Gram-ujemnych. Med Dośw Mikrobiol 1976; 28:109-19.
• 8. Kałużewski S. Twardziel str.378-386. W: Choroby zakaźne i ich zwalczanie na ziemiach polskich w XX wieku. Red. J. Kostrzewski, W. Magdzik, D. Naruszewicz-Lesiuk. PZWL, Warszawa, 2001
• 9. Kałużewski S. Informacja własna. Dane niepublikowane.
• 10. Kim NR, Han J, Kwon TY. Nasal rhinoscleroma in a nonendemic area: a case report. J Korean Med. Sci 2003; 18:455-8.
• 11. Krasilnikow AP, Izraitiel NA. Sklerema (mikrobiologia, epidemiologia, diagnostyka).Izd. Biełarus, Minsk 1971.
• 12. Lubin JR, Jallow SE, Wilson WR i inni. Rhinoscleroma with exophthalmus: a case report. Br J Ophthalmol 1981;65:14-7.
• 13. Maglad S, Satir AA. Rhinoscleroma - a case report. East Afr Med. J 1985; 62:420-2.
• 14. Muzyka MM, Gubina KM. Problems of the epidemiology of scleroma. I. Geographical distribution of scleroma. J Hyg Epidemiol Microbiol Immunol 1971; 15:233-42.
• 15. Nowicki W. Twardziel. PZWL, Warszawa 1950
• 16. Rastawicki W. Humoralna odpowiedź na wybrane antygeny pałeczek Yersinia enterocolitica i Yersinia pseudotuberculosis w przebiegu jersiniozy u ludzi. I. Występowanie i poziom przeciwciał dla somatycznych antygenów pałeczek Yersinia oraz wydzielniczych białek Yop wykrytych odczynem ELISA. Med. Dośw Mikrobiol 2006; 58:303-19.
• 17. Soni NK, Hemani DD. Scleroma of the eustachian tube: salpingoscleroma. J Laryngol Otol 1994; 108:944-6.
• 18. Trautmann M, Held Th, Ruhnke M, Schnoy N. A case of rhinoscleroma cured with ciprofloxacin. Infection 1993;21:403-406.