Improvement of Aureobasidium pullulans A.P.-3 for pullulan biosynthesis by assiciated mutagenesis

• Autorzy: Gniewosz M. , Sobczak E. , Wojciechowska D. , Kuthan-Styczen J.

Warianty tytułu

PL

Doskonalenie szczepu Aureobasidium pullulans A.P.-3 w produkcji pullulanu na drodze mutagenizacji skojarzonej

• Języki publikacji: EN

Abstrakty

EN

The strain Aureobasidium pullulans A.p.-3 was subjected to mutagenesis to improve its ability to pullulan biosynthesis. The mutagenesis of 18-h old culture was carried out in two variants using ethylen imine (EI) and ultraviolet (UV) radiation at the EI concentration and UV exposure times of 2.0 mg/mL and 1.5 min (variant I), and 2.0 mg/mL and 2.0 min (variant II). Among 240 cultures examined, the positive mutants made 26% for variant I and 13% for variant II. Two best black mutants Dy-17 and Dx-30 synthesized the polysaccharide with the yields greater than those of parent strain by 24 and 21%, respectively. White mutant was also obtained, the pullulan yield for which was on the level as for strain A.p.-3, but free from melanin contaminants. Acquired characteristic of black mutants was found stable when re-examined after 3- and 6-month storage at 4°C. The kinetics of pullulan biosynthesis by black mutants indicated that the pullulan production was intensified beginning from the second day of culturing, as compared to strain A.p.-3.

PL

Celem badań było podwyższenie zdolności biosyntezy pullulanu szczepu Aureobasidium pullulam A.p.-3 na drodze mutagenizacji skojarzonej. Sprawdzono wrażliwość 18 i 48 h hodowli szczepu na promieniowanie UV (rys. 1) oraz wyznaczono parametry podwójnej mutagenizacji (rys. 2), przy założonej przeżywalności konidiów równej 10%. Zastosowano dwa warianty mutagenizacji skojarzonej: etylenoimina (El) 2.0 mg/ mL przez 90' z 1.5 min promieniowaniem UV oraz El 2.0 mg/ mL przez 90' z 2.0' naświetlaniem UV Z przebadanych 240 kolonii (po 120 z każdego wariantu), grupa pozytywnych mutantów (D) stanowiła odpowiednio dla wariantów: 26% i 13% (rys. 3). Wyselekcjonowano także 4 mutanty o zmienionej pigmentacji kolonii: dwa brązowe, żółty i biały, lecz mutanty te nie posiadały cechy nadproduktywności pullulanu (tab. 2). Najlepsze dwa mutanty Dy-15 i Dx-30 produkowały odpowiednio 36.2 i 35.2 g/L polisacharydu, co daje o 25% i 21% wyższą wydajność w stosunku do szczepu rodzicielskiego A.p.-3 (tab. 1). Mutanty te przechowywano w temp. +4°C przez pół roku, badając co 3 miesiące stabilność nabytej cechy (tab. 3) oraz kinetykę biosyntezy pullulanu, wzrostu biomasy grzyba, zużycia sacharozy i zmian pH w ciągu 96 h hodowli na wstrząsarce posuwisto-zwrotnej (tab. 4). Badane mutanty zachowały swe zdolności biosyntezy pullulanu, a kinetyka procesu wykazała zintensyfikowanie wydzielania pullulanu już od drugiej doby hodowli.

Słowa kluczowe

PL

pullulan; mutagenizacja skojarzona; biosynteza; produkcja; Aureobasidium pullulans

• Wydawca: -
• Czasopismo: Polish Journal of Food and Nutrition Sciences
• Rocznik: 1999
• Tom: 08
• Numer: 2
• Opis fizyczny: s.235-243,wykr.,rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Gniewosz M.

• Szkola Glowna Gospodarstwa Wiejskiego, ul.Rakowiecka 26-30, 02-528 Warszawa

autor

Sobczak E.

autor

Wojciechowska D.

autor

Kuthan-Styczen J.