EN
Three kinds of high-molecular polysaccharides: alginate, chitosan and carrageenan, were tested as carriers for the immobilisation of proteolytic enzymes. The catalytic system consisted of the endopeptidase - chymotrypsin and exopeptidases: carboxypeptidase A and leucine aminopeptidase. Subsequently, this immobilised system was used for making of enzymatic hydrolysates of casein. In the case of periodic method of casein hydrolysis the best results (71.9% of tyrosine and tryptophan released) were achieved after 72 h, at substrate concentration 0.5% and with alginate as a carrier. In the semi-continuous method chitosan appeared to be the best carrier and after 72 h the degree of hydrolysis was 48.6% (52.7% of tyrosine and tryptophan released) at the concentration of casein 2%.
PL
W pracy wykorzystano techniki unieruchamiania enzymów w celu minimalizacji kosztów hydrolizy enzymatycznej przez stworzenie możliwości wielokrotnego wykorzystania enzymów proteolitycznych. Do immobilizacji wykorzystano nośniki organiczne: alginian, chitozan i karagenian. W skład unieruchamianego zestawu enzymów wchodziły: aminopeptydaza leucynowa, chymotrypsyna i karboksypeptydaza A. Jako substrat służyła kazeina. Roztwór kazeiny poddawano działaniu unieruchomionych enzymów przy zastosowaniu metody okresowej (hydroliza prowadzona w kolbach na wstrząsarce w termostatowanym boksie w temperaturze 30°C) oraz metody półciągłej (na kolumnie) przy użyciu układu opisanego w Metodach. Ustalono, że najlepsze rezultaty podczas enzymatycznej hydrolizy prowadzonej metodą okresową osiągane są po upływie 72 godzin dla 0,3% roztworu kazeiny przy zastosowaniu 2 g biokatalizatora (rys. 4-6). Najwyższy stopień uwolnienia tyrozyny i tryptofanu (71,9%) uzyskano dla enzymów unieruchomionych na alginianie (rys. 5). Stwierdzono, iż spośród trzech użytych nośników najlepsze wyniki (48,6%) osiągnięto stosując chitozan (tab. 1).