Stymulacja czasteczek adhezyjnych srodblonka naczyniowego przez polisacharyd otoczkowy, lipopolisacharyd oraz komponenty lipopolisacharydu Bacteroides thetaiotaomicron

• Autorzy: Rokosz A. , Meisel-Mikolajczyk F. , Malchar C. , Nowaczyk M. , Gorski A.
• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Badano wpływ antygenów powierzchniowych: polisacharydu otoczkowego, lipopolisacharydu i komponentów LPS B. thetaiotaomicron na ekspresję molekuł adhezyjnych ICAM-1, VCAM-1 i selektyny E na powierzchni komórek śródbłonka naczyniowego (linia HMEC-1). Cząsteczki adhezyjne oznaczano za pomocą testu immunoenzymatycznego ELISA z przeciwciałami monoklonalnymi dla ludzkich: ICAM-1, VCAM- 1 i selektyny E. Najsilniejszymi stymulatorami cząsteczek adhezyjnych były lipopolisacharydy, a następnie części lipidowe LPS (lipid A). Polisacharyd otoczkowy (CPS) stymulował ekspresję wszystkich molekuł adhezyjnych, ale tylko w największym stężeniu. Nąjsłabszymi stymulatorami ICAM-1, VCAM-1 i selektyny E były części polisacharydowe (PS) LPS. Niektóre preparaty PS nie wykazały aktywności stymulacyjnej.

EN

The aim of this study was to assay the influence of capsular polysaccharide (CPS), lipopolysaccharide (LPS) and components of B. thetaiotaomicron lipopolysaccharide - polysaccharide part (PS) and lipid part (lipid A) on the expression of adhesion molecules associated with inflammation (ICAM-1, VCAM-1, E-selectin) on the surface of vascular endothelial cells. Capsular polysaccharide was isolated by the method of Poxton and Ip (1981). Lipopolysaccharides were extracted using the hot phenol-water method (Westphal and Jann, 1965). Components of LPS were prepared by mild acid hydrolysis of lipopolysaccharide. Experiments with bacterial compounds at concentrations 10, 1, 0.1 and 0.01 (mg/ml) were performed on HMEC-1 cell line (human dermal microvascular endothelial cells). Immunoenzymatic ELISA test with mouse monoclonal antibodies against human: ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin was applied to determine adhesion molecules. Resting HMEC-1 and E. coli 055:B5 LPS were used as controls in each experiment. Lipopolysaccharides were the strongest stimulants of endothelial adhesion molecules. Capsular polysaccharide caused the expression of three adhesion molecules, but only at the highest concentration (10 mg/ml). The stimulatory activities of LPS lipid components were much higher than the activities of polysaccharide parts. PS preparations did not reveal the property of adhesion molecule stimulation or their activities were weak. The activity of B. thetaiotaomicron cell-surface antigens in the process of adhesion molecule stimulation on vascular endothelium was lower than the activity of E. coli LPS.

Słowa kluczowe

PL

srodblonek naczyniowy; mikroflora jelitowa; lipopolisacharydy; polisacharydy otoczkowe; przeciwciala; Bacteroides thetaiotaomicron; adhezja; test ELISA; czlowiek

• Wydawca: -
• Czasopismo: Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia
• Rocznik: 2000
• Tom: 52
• Numer: 3
• Opis fizyczny: s.275-282,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Rokosz A.

• Akademia Medyczna, 02-004 Warszawa, ul.Chalubinskiego 5

autor

Meisel-Mikolajczyk F.

autor

Malchar C.

autor

Nowaczyk M.

autor

Gorski A.

Bibliografia

• 1. Babb JL, Cummins CS. Encapsulation of Bacleroides species. Infect Immun 1978; 19: 1088-91.
• 2. Carlos TM, Harlan JM. Leukocyte-endothelial adhesion molecules. Blood 1994; 84: 2068-101.
• 3. Finegold SM. Anaerobic infections in human: an overview. Anaerobe 1995; 1: 3-9.
• 4. Gmeiner J. The isolation of two different lipopolysaccharide fractions from various Proteus mirabilis strains. Eur J Biochem 1975; 58: 621-26.
• 5. Gorbach SL, Bartlett JG. Anaerobic infections. N Engl J Med 1974; 90: 1177-84.
• 6. Górski A. The role of cell adhesion molecules in immunopathology. Immunol Today 1994; 15: 251-55.
• 7. Hofstad T. Virulence factors in anaerobic bacteria. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1992; 11: 1044-48.
• 8. Kaca W. The role of polysaccharide part of Proteus mirabilis lipopolysaccharides in interaction with human cells and proteins. Post Mikrobiol 1996; 35: 503-07.
• 9. Kasper DL. The polysaccharide capsule of Bacteroides fragilis subspecies fragilis: immunochemical and morphologic definition. J Infect Dis 1976; 133: 79-87.
• 10. Kasper DL. Virulence factors of anaerobic bacteria: an overview. Rev Infect Dis 1979; 1: 246-47.
• 11. Lynn WA, Golenbock DT. Lipopolysaccharide antagonists. Immunol Today 1992; 13: 271-76.
• 12. Meisel-Mikołajczyk F, Rokosz A, Kaca W. The cell-surface antigens of Bacteroides thetaiotaomicron. Eur J Epidemiol 1989; 5: 486-96.
• 13. Meisel-Mikołajczyk F, Rouyan GS, Dybowska B i inni. Human T ceii adhesion to endothelium stimulated by membrane components extracted from strains of Bacteroides vulgatus (member of B. fragilis group). Arch Immunol Ther Exp 1993; 41: 129-31.
• 14. Poxton IR, Ip MKY. The cell-surface antigens of Bacteroides vulgatus. J Gen Microbiol 1981; 126: 103-09.
• 15. Rokosz A. Immunochemiczne właściwości antygenów powierzchniowych Bacteroides thetaiotaomicron. Praca doktorska, Akademia Medyczna w Warszawie, 1988.
• 16. Rokosz A, Meisel-Mikołajczyk F. Bacteroides thetaiotaomicron strains of different origin. Bull Pol Acad Sci (Biol Sci) 1988; 36: 163-69.
• 17. Rokosz A, Meisel-Mikołajczyk F, Malchar C i inni. The expression of adhesion molecules induced by Bacteroides thetaiotaomicron cell-surface antigens. Immunologist 1997; 5 (Suppl 1): 51.
• 18. Rokosz A, Meisel-Mikołajczyk F, Kot K i inni. Toksyny pałeczek Bacteroides fragilis i Bacteroides thetaiotaomicron jako stymulatory powstawania cząsteczek adhezyjnych na powierzchni komórek śródbłonka naczyniowego. Med Dośw Mikrobiol 1999; 51: 133-42.
• 19. Strohm H, Payne CM, Ryan KJ. Demonstration of Bacteroides capsules by light microscopy and ultrastructural cytochemistry. Am J Clin Pathol 1983; 79: 591-97.
• 20. Summanen P, Baron EJ, Citron DM i inni. Wadsworth Anaerobic Bacteriology Manual. Star Publishing Company. 5th ed, Belmont, Ca 1993.
• 21. Westphal O, Jann K. Bacterial lipopolysaccharides. Extraction with phenol-water and further applications of the procedure. Methods Carbohydr Chem 1965; 5: 83-91.
• 22. Williamson SI, Wannemuehler MJ, Jirillo E i inni. LPS regulation of the immune response: separate mechanisms for murine B cell activation by lipid A (direct) and polysaccharide (macrophage-dependent) derived from Bacteroides LPS. J Immunol 1984; 133: 2294-300.