PL
Ekotypy Arabidopsis thaliana L. Heynh takie jak Columbia, C-24, czy Landsberg, które są powszechnie wykorzystywane w biologii molekularnej, cechuje niski potencjał morfogenetyczny w kulturach in vitro. W pracy podjęto próbę optymalizacji warunków dla regeneracji pędów Arabidopsis thaliana ekotyp Columbia w kulturach in vitro. Eksplantaty izolowano z 2- tygodniowych siewek hodowanych na zmodyfikowanej pożywce Murashige i Skooga [1962] zestalonej agarem (eksplantaty korzeni i liści), bądź z prekultury korzeni prowadzonej w pożywce płynnej (eksplantaty korzeni) i wykładano na pożywki indukujące kalus. Pożywki zawierały następujące rodzaje i stężenia regulatorów wzrostu: 2,2 mg·dm⁻³ 2,4-D + 0,05 mg·dm⁻³ K (pożywka CIM PG1) oraz 5,0 mg·dm⁻³ IAA + 0,5 mg·dm⁻³ 2,4-D + 0,3 mg·dm⁻³ K (pożywka CIM R3). Po tygodniu kultury, eksplantaty przenoszono na pożywkę indukującą tworzenie pędów z 0,15 mg·dm⁻³ IAA + 5,0 mg·dm⁻³ 2iP. Na eksplantatach liści tworzył się tylko kalus. Najlepszą zdolność do tworzenia pędów wykazały fragmenty korzeni, izolowane z 2-tygodniowych siewek oraz pochodzące z 2-tygodniowej prekultury. Wykazano, iż następczy wpływ na zwiększenie efektywności regeneracji pędów, miała inkubacja fragmentów korzeni na pożywce CIM R3, która poprzedzała pasaż eksplantatów na pożywkę stymulująca organogenezę.
EN
Arabidopsis thaliana ecotypes such as Columbia, C-24 or Landsberg, widely used in molecular biology, present low regeneration efficiency. The influence of explants and growth regulators that were added to Murashige and Skoog [1962] medium supplemented with Gamborg’s B5 vitamins on shoots regeneration of Arabidopsis thaliana ecotype Columbia were compared. The number of obtained fertile plants, was also evaluated. Sources of explants were 14 days old seedlings (leaf and root explants), sterile grown on solid medium or precultured roots (root explants) maintained in a liquid medium. Explants were placed on the medium inducing callus containing: 2,4-D 2.2 mg·dm⁻³; kinetin 0.05 mg·dm⁻³ (CIM PG1 medium), and IAA 5.0 mg·dm⁻³; 2,4-D 0.5 mg·dm⁻³; kinetin 0.3 mg·dm⁻³ (CIM R3 medium). After 7 days they were transferred onto the shoot inducing medium supplemented with IAA 0.15 mg·dm⁻³; 2iP 5.0 mg·dm⁻³. The leaf explants formed callus only. The highest organogenesis rate was observed on root explants incubated on the CIM R3 medium before being replaced onto the shoot inducing medium.