Indukowanie embriogenezy somatycznej w kulturach in vitro gatunków rodzaju Trifilium oraz analiza molekularna uzyskanych regenerantów pokolenia R1 z wykorzystaniem markerów RAPD

• Autorzy: Broda Z. , Torz L. , Florek K.

Warianty tytułu

EN

Induction of somatic embryogenesis in in vitro cultures of Tryfolium genus species and molecular analysis of regeneration plants of R1 progeny using RAPD markers

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

PL

Indukcję somatycznej embriogenezy w rodzaju Trifolium przeprowadzono u 8 odmian pochodzących z trzech gatunków: Trifolium pratense - odmiany: 'Hruszowska', 'Nike', 'Dajana', 'Jubilatka', 'Ulka', 'Karo'; Trifolium resupinatum odmiana 'Ira' oraz Trifolium incarnatum odmiana 'Opolska'. Kalus indukowano na pożywce PHILLIPS, COLLINS [1979] z modyfikacjami wg RYBCZYŃSKIEGO [1991] zawierającej 2 mg·dm⁻³ 2,4-D, 0,1 mg·dm⁻³ BAP, 0,06 mg·dm⁻³ picloramu oraz 2 mg·dm⁻³ 2iP. Efektywność somatycznej embriogenezy oceniano na dwóch rodzajach eksplantatów: liścieniach i hypokotylach pobieranych z 5-6 dniowych sterylnych siewek. Namnażanie kalusa i formowanie się w nim zarodków przebiegało na pożywce różnicującej, zawierającej ten sam skład jak pożywka indukująca za wyjątkiem 2iP, który zastąpiono 0,2 mg·dm⁻³ zeatyny. Pasażowanie zarodków somatycznych na pożywkę regeneracyjną MURASHIGE, SKOOG [1962] przyspieszało ich rozwój i doprowadzało do wzrostu roślin. Embriogenny kalus uzyskano tylko u odmiany 'Opolska' z gatunku Trifolium incarnatum z obu rodzajów eksplantatów. Analiza molekularna wykonana techniką PCR z wykorzystaniem markerów RAPD wskazuje na niski stopień podobieństwa genetycznego pomiędzy odmianą wyjściową 'Opolska', a jej klonami uzyskanymi na drodze somatycznej embriogenezy.

EN

Induction of somatic embryogenesis in Trifolium genus was been carried out on eight varieties from three species: Trifolium pretense ('Hruszowska', 'Nike', 'Dajana', 'Jubilatka', 'Ulka', 'Karo' cvs.); Trifolium resupinatum (cv. 'Ira') and Trifolium incarnatum (cv. 'Opolska'). The callus was obtained on PHILLIPS, COLLINS [1979] medium with modifications by Rybczyński [1991], Somatic embryogenesis was induced on two of explants: cotyledons and hypocotyls. The medium contained 2.0 mg·dm⁻³ 2,4-D, 0.1 mg·dm⁻³ BAP, 0.06 mg·dm⁻³ picloram and 2.0 mg·dm⁻³ 2iP. Proliferation of callus and formation of embryos were carried out on differentiating medium with composition the same as induction medium, except of 2iP, that was replaced by 0.2 mg·dm⁻³ zeatin. Transfer of somatic embryos on regeneration medium MURASHIGE, SKOOG [1962] accelerated their development and affected plant growth. Embryogenic callus was obtained only from 'Opolska' cv. of Trifolium incarnatum from both types of explants. Molecular analysis performed with PCR technique using RAPD markers, indicated low level of genetic similarity between 'Opolska' cultivar and clones obtained by somatic embryogenesis.

• Wydawca: -
• Czasopismo: Zeszyty Problemowe Postępów Nauk Rolniczych
• Rocznik: 2002
• Tom: 488
• Numer: 1
• Opis fizyczny: s.134-144,fot.,rys.,tab.,bibliogr.

Twórcy

autor

Broda Z.

• Katedra Genetyki i Hodowli Roślin, Akademia Rolnicza im.A.Cieszkowskiego w Poznaniu, ul.Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań

autor

Torz L.

• Katedra Genetyki i Hodowli Roślin, Akademia Rolnicza im.A.Cieszkowskiego w Poznaniu, ul.Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań

autor

Florek K.

• Katedra Genetyki i Hodowli Roślin, Akademia Rolnicza im.A.Cieszkowskiego w Poznaniu, ul.Wojska Polskiego 71c, 60-625 Poznań

Bibliografia

• BEACH K.H., SMITH R.S. 1979. Plant regeneration from callus of red and crimson clover. Plant Sci. Lett. 16: 231-237.
• GRAHAM P.H. 1968. Growth of Medicago sativa and Trifolium subterraneum in callus and suspension culture. Phyton 25: 159-162.
• MURASHIGE T., SKOOG F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 15: 473-497.
• MYERS J.R., GROSSER J.W., TAYLOR N.L., COLLINS N.L. 1989. Genotype-dependet whole plant regeneration from protoplasts of red clover (T. pratense L.). Plant Cell, Tissue and Organ Culture 19: 113-127.
• NEI M., LI W.H. 1979. Mathematical model for studying genetic variation in terms of restriction endonucleases. Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 79: 5269-5273.
• PEDERSON G.A. 1986. In vitro culture and somatic embryogenesis of four Trifolium species. Plant Sci. 45: 101-104.
• PHILLIPS G.C., COLLINS G.B. 1979. In vitro tissue culture of selected Legumes and plant regeneration trom callus culture of red clover. Crop Sci. 19: 59-64.
• PHILLIPS G.C., COLLINS G.B. 1979. Virus symptom - free plants of red clover using meristem culture. Crop Sci. 16: 213-216.
• RYBCZYŃSKI. J.J. 1991. Regeneracja roślin w kulturach in vitro niektórych gatunków z rodziny Fabaceae. Rozprawy Naukowe i Monografie, Wydawnictwo SGGW Warszawa: 7-50.
• THOMPSON D., HENRY R. 1995. Single-step protocol for preparation of plant tissue for analysis by PCR. Biotechniques 19: 394-400.
• OSWALD K.J., SMITH A.H., PHILLIPS D.V. 1977. Callus and plant regeneration from cell cultures ofladino clover and soybean. Physiol. Plant. 39: 129-134.
• WEEB K.J., FAY M.F., DALLE P. J. 1987. An investigation of morphogenesis within the genus Trifolium. Plant Cell Tissue and Organ Culture 11: 37-46.